中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2008年
8期
1506-1509
,共4页
刘宏%ZHANG Su-zhan%蔡善荣%TAO Si-feng%董琦
劉宏%ZHANG Su-zhan%蔡善榮%TAO Si-feng%董琦
류굉%ZHANG Su-zhan%채선영%TAO Si-feng%동기
MicroRNA%结直肠肿瘤%SW480细胞%蛋白质KRAS
MicroRNA%結直腸腫瘤%SW480細胞%蛋白質KRAS
MicroRNA%결직장종류%SW480세포%단백질KRAS
目的:探讨结肠癌细胞中microRNA143(miR-143)对KRAS蛋白表达的影响及其作用机制.方法:从基因组DNA中克隆pri-miR-143基因,构建miR-143的表达载体.miR-143转染结肠癌细胞系SW480,用Northern blotting方法测定miR-143水平的变化,通过RT-PCR和Western blotting方法检测转染细胞中KRAS基因的表达.构建含miR-143结合位点的荧光素酶报告载体,与miR-143表达载体共转染,检测细胞中的荧光素酶活性.结果:基因转染的SW480细胞中miR-143的表达显著升高,KBAS蛋白的表达水平下降约40%,KRAS mRNA则未受影响.miR-143表达载体与含miR-143结合位点的报告载体共转染可以抑制细胞中的荧光素酶活性.结论:结肠癌细胞中microRNA143在转录后水平抑制KRAS蛋白的表达.
目的:探討結腸癌細胞中microRNA143(miR-143)對KRAS蛋白錶達的影響及其作用機製.方法:從基因組DNA中剋隆pri-miR-143基因,構建miR-143的錶達載體.miR-143轉染結腸癌細胞繫SW480,用Northern blotting方法測定miR-143水平的變化,通過RT-PCR和Western blotting方法檢測轉染細胞中KRAS基因的錶達.構建含miR-143結閤位點的熒光素酶報告載體,與miR-143錶達載體共轉染,檢測細胞中的熒光素酶活性.結果:基因轉染的SW480細胞中miR-143的錶達顯著升高,KBAS蛋白的錶達水平下降約40%,KRAS mRNA則未受影響.miR-143錶達載體與含miR-143結閤位點的報告載體共轉染可以抑製細胞中的熒光素酶活性.結論:結腸癌細胞中microRNA143在轉錄後水平抑製KRAS蛋白的錶達.
목적:탐토결장암세포중microRNA143(miR-143)대KRAS단백표체적영향급기작용궤제.방법:종기인조DNA중극륭pri-miR-143기인,구건miR-143적표체재체.miR-143전염결장암세포계SW480,용Northern blotting방법측정miR-143수평적변화,통과RT-PCR화Western blotting방법검측전염세포중KRAS기인적표체.구건함miR-143결합위점적형광소매보고재체,여miR-143표체재체공전염,검측세포중적형광소매활성.결과:기인전염적SW480세포중miR-143적표체현저승고,KBAS단백적표체수평하강약40%,KRAS mRNA칙미수영향.miR-143표체재체여함miR-143결합위점적보고재체공전염가이억제세포중적형광소매활성.결론:결장암세포중microRNA143재전록후수평억제KRAS단백적표체.