军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2012年
7期
520-523
,共4页
黄思斯%焦杨%谢萍%王青%张令强
黃思斯%焦楊%謝萍%王青%張令彊
황사사%초양%사평%왕청%장령강
DNA损伤%CUL4A-DDB1%串联亲和纯化
DNA損傷%CUL4A-DDB1%串聯親和純化
DNA손상%CUL4A-DDB1%천련친화순화
目的 为了鉴定并验证CUL4A-DDB1泛素连接酶复合体中参与DNA损伤修复反应过程的1~2种关键成分在损伤识别、早期及晚期修复中的动态变化,拟构建含有串联亲和纯化(TAP)标签载体并筛选高表达CUL4A/ DDB1的细胞株,建立DNA双链断裂模型.方法 利用PCR获得CUL4A/DDB1基因,构建重组表达载体pNTAP-A-CUL4A/ DDB1;使用顺铂和电离辐射刺激等外界刺激建立合适的DNA双链断裂细胞模型,使用G418筛选稳定表达CUL4A/ DDB1的细胞株.结果 与结论 成功构建pNTAP-A-CUL4A/ DDB1表达载体,建立合适的DNA双链断裂细胞模型,筛选得到稳定表达CUL4A/ DDB1的细胞稳定株,为下一步质谱分析CUL4A-DDB1泛素连接酶在DNA损伤修复过程中的新功能打下基础.
目的 為瞭鑒定併驗證CUL4A-DDB1汎素連接酶複閤體中參與DNA損傷脩複反應過程的1~2種關鍵成分在損傷識彆、早期及晚期脩複中的動態變化,擬構建含有串聯親和純化(TAP)標籤載體併篩選高錶達CUL4A/ DDB1的細胞株,建立DNA雙鏈斷裂模型.方法 利用PCR穫得CUL4A/DDB1基因,構建重組錶達載體pNTAP-A-CUL4A/ DDB1;使用順鉑和電離輻射刺激等外界刺激建立閤適的DNA雙鏈斷裂細胞模型,使用G418篩選穩定錶達CUL4A/ DDB1的細胞株.結果 與結論 成功構建pNTAP-A-CUL4A/ DDB1錶達載體,建立閤適的DNA雙鏈斷裂細胞模型,篩選得到穩定錶達CUL4A/ DDB1的細胞穩定株,為下一步質譜分析CUL4A-DDB1汎素連接酶在DNA損傷脩複過程中的新功能打下基礎.
목적 위료감정병험증CUL4A-DDB1범소련접매복합체중삼여DNA손상수복반응과정적1~2충관건성분재손상식별、조기급만기수복중적동태변화,의구건함유천련친화순화(TAP)표첨재체병사선고표체CUL4A/ DDB1적세포주,건립DNA쌍련단렬모형.방법 이용PCR획득CUL4A/DDB1기인,구건중조표체재체pNTAP-A-CUL4A/ DDB1;사용순박화전리복사자격등외계자격건립합괄적DNA쌍련단렬세포모형,사용G418사선은정표체CUL4A/ DDB1적세포주.결과 여결론 성공구건pNTAP-A-CUL4A/ DDB1표체재체,건립합괄적DNA쌍련단렬세포모형,사선득도은정표체CUL4A/ DDB1적세포은정주,위하일보질보분석CUL4A-DDB1범소련접매재DNA손상수복과정중적신공능타하기출.
