CAJ | 학술논문

[目的]建立GAPDH内参基因实时荧光定量PCR方法,为进一步研究中国美利奴羊(新疆型)相关基因的定量表达奠定基础.[方法]采用中国美利奴羊(新疆型)皮肤组织为试材,根据Genebank中绵羊GAPDH基因序列,设计并合成一对引物,建立基于SYBR Green I染料技术的Real - Time PCR检测体系,绘制出标准曲线并对其熔解曲线分析.[结果]以cDNA为模板建立的标准曲线循环阈值(Ct)与标准cDNA模板在一定浓度范围内呈良好的线性关系,GAPDH基因标准曲线中模板拷贝数(X)与Ct值的关系为Ct=-3.679 5lgX+ 35.648,相关系数R=0.999 8；试验重复性好,批内和批间变异系数(CV％)分别为0.22％～3.45％和1.30％～4.89％.[结论]所建立的方法具有快速、线性范围广、重复性强等特点,GAPDH可作为内参基因用于绵羊相关基因的定量表达研究.
[목적]건립GAPDH내삼기인실시형광정량PCR방법,위진일보연구중국미리노양(신강형)상관기인적정량표체전정기출.[방법]채용중국미리노양(신강형)피부조직위시재,근거Genebank중면양GAPDH기인서렬,설계병합성일대인물,건립기우SYBR Green I염료기술적Real - Time PCR검측체계,회제출표준곡선병대기용해곡선분석.[결과]이cDNA위모판건립적표준곡선순배역치(Ct)여표준cDNA모판재일정농도범위내정량호적선성관계,GAPDH기인표준곡선중모판고패수(X)여Ct치적관계위Ct=-3.679 5lgX+ 35.648,상관계수R=0.999 8；시험중복성호,비내화비간변이계수(CV％)분별위0.22％～3.45％화1.30％～4.89％.[결론]소건립적방법구유쾌속、선성범위엄、중복성강등특점,GAPDH가작위내삼기인용우면양상관기인적정량표체연구.