中华肝胆外科杂志
中華肝膽外科雜誌
중화간담외과잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOBILIARY SURGERY
1998年
5期
293-297
,共5页
吴育连%顾才校%彭淑牖%沈宏伟
吳育連%顧纔校%彭淑牖%瀋宏偉
오육련%고재교%팽숙유%침굉위
胰腺癌%Mrna原位杂交%Ki-67基因%免疫组化
胰腺癌%Mrna原位雜交%Ki-67基因%免疫組化
이선암%Mrna원위잡교%Ki-67기인%면역조화
目的应用地高辛标记的Ki-67 cRNA(against exon 13 of the gene)进行mRNA原位杂交和免疫组化分析胰腺癌中Ki-67基因的mRNA转录和蛋白翻译,研究Ki-67基因结构和功能表达的关系.方法 40例胰腺癌(20例高分化腺癌,20例低分化腺癌),9例非胰腺肿瘤(5例正常胰腺,4例慢性胰腺炎),Ki-67基因第13外显子cDNA片段(435 bp)由PCR扩增,然后PCR产物克隆到质粒(3.9kb PCRTMⅡ vector)进行扩增,以此模板合成地高辛标记的cDNA探针,应用mRNA原位杂交结合免疫组化研究Ki-67基因在胰腺癌的转录和蛋白翻译.结果应用地高辛标记的Ki-67 mRNA原位杂交和MIB-1免疫组化成功地检测胰腺癌巢中明显高于正常的Ki-67 mRNA转录和蛋白翻译,胰腺癌Ki-67表达明显高于非胰腺癌,并与胰腺癌组织学分级密切相关.结论本研究首次证明:人类胰腺癌存在Ki-67基因的过度转录和翻译;且此基因的表达强度与胰腺癌的组织学分级亦密切相关,此基因的exon 13的转录在最终Ki-67蛋白的过度表达中起极重要的作用.
目的應用地高辛標記的Ki-67 cRNA(against exon 13 of the gene)進行mRNA原位雜交和免疫組化分析胰腺癌中Ki-67基因的mRNA轉錄和蛋白翻譯,研究Ki-67基因結構和功能錶達的關繫.方法 40例胰腺癌(20例高分化腺癌,20例低分化腺癌),9例非胰腺腫瘤(5例正常胰腺,4例慢性胰腺炎),Ki-67基因第13外顯子cDNA片段(435 bp)由PCR擴增,然後PCR產物剋隆到質粒(3.9kb PCRTMⅡ vector)進行擴增,以此模闆閤成地高辛標記的cDNA探針,應用mRNA原位雜交結閤免疫組化研究Ki-67基因在胰腺癌的轉錄和蛋白翻譯.結果應用地高辛標記的Ki-67 mRNA原位雜交和MIB-1免疫組化成功地檢測胰腺癌巢中明顯高于正常的Ki-67 mRNA轉錄和蛋白翻譯,胰腺癌Ki-67錶達明顯高于非胰腺癌,併與胰腺癌組織學分級密切相關.結論本研究首次證明:人類胰腺癌存在Ki-67基因的過度轉錄和翻譯;且此基因的錶達彊度與胰腺癌的組織學分級亦密切相關,此基因的exon 13的轉錄在最終Ki-67蛋白的過度錶達中起極重要的作用.
목적응용지고신표기적Ki-67 cRNA(against exon 13 of the gene)진행mRNA원위잡교화면역조화분석이선암중Ki-67기인적mRNA전록화단백번역,연구Ki-67기인결구화공능표체적관계.방법 40례이선암(20례고분화선암,20례저분화선암),9례비이선종류(5례정상이선,4례만성이선염),Ki-67기인제13외현자cDNA편단(435 bp)유PCR확증,연후PCR산물극륭도질립(3.9kb PCRTMⅡ vector)진행확증,이차모판합성지고신표기적cDNA탐침,응용mRNA원위잡교결합면역조화연구Ki-67기인재이선암적전록화단백번역.결과응용지고신표기적Ki-67 mRNA원위잡교화MIB-1면역조화성공지검측이선암소중명현고우정상적Ki-67 mRNA전록화단백번역,이선암Ki-67표체명현고우비이선암,병여이선암조직학분급밀절상관.결론본연구수차증명:인류이선암존재Ki-67기인적과도전록화번역;차차기인적표체강도여이선암적조직학분급역밀절상관,차기인적exon 13적전록재최종Ki-67단백적과도표체중기겁중요적작용.
