CAJ | 학술논문

目的:HER2/neu过度表达见于多种恶性肿瘤.作为肿瘤抗原,p185erbB2是一个理想的肿瘤治疗靶点.本实验在既往工作基础上,构建嵌合型抗p185erB2单克隆抗体(单抗)的真核表达载体,并在CHO-dhfr-细胞中表达,从而降低鼠源性抗体的免疫原性,为进一步的应用研究奠定基础.方法:RT-PCR扩增p185erbB2单抗1-2的轻、重链可变区基因,插入嵌合抗体真核表达载体pWSD2中,脂质体转染CHO-dhfr-细胞.经RT-PCR、间接ELISA、Western blot检测人-鼠嵌合抗体的表达水平,用ELISA、免疫沉淀方法对嵌合抗体的亲和力和特异性进行初步鉴定.此外,采用MTT比色法检测嵌合抗体对高表达p185erbB2的乳腺癌细胞系SKBR3的生长抑制作用.结果:用RT-PCR、间接ELISA、Western blot方法证明人-鼠嵌合抗体在CHO-dhfr-细胞中表达;ELISA检测提示嵌合抗体与高表达p185erbB2的细胞反应阳性,与低表达p185erbB2的细胞反应阴性;免疫沉淀结果表明嵌合抗体可与p185erbB2分子特异性结合;MTT比色法检测表明嵌合抗体对过表达p185erbB2的乳腺癌细胞SKBR3的生长有抑制作用.结论:CHO-dhfr-细胞表达的人-鼠嵌合抗体可与p185erbB2特异性结合,并可抑制高表达p185erbB2的肿瘤细胞生长,表明抗人p185erbB2人-鼠嵌合抗体具有肿瘤生物治疗的潜在应用价值.
목적:HER2/neu과도표체견우다충악성종류.작위종류항원,p185erbB2시일개이상적종류치료파점.본실험재기왕공작기출상,구건감합형항p185erB2단극륭항체(단항)적진핵표체재체,병재CHO-dhfr-세포중표체,종이강저서원성항체적면역원성,위진일보적응용연구전정기출.방법:RT-PCR확증p185erbB2단항1-2적경、중련가변구기인,삽입감합항체진핵표체재체pWSD2중,지질체전염CHO-dhfr-세포.경RT-PCR、간접ELISA、Western blot검측인-서감합항체적표체수평,용ELISA、면역침정방법대감합항체적친화력화특이성진행초보감정.차외,채용MTT비색법검측감합항체대고표체p185erbB2적유선암세포계SKBR3적생장억제작용.결과:용RT-PCR、간접ELISA、Western blot방법증명인-서감합항체재CHO-dhfr-세포중표체;ELISA검측제시감합항체여고표체p185erbB2적세포반응양성,여저표체p185erbB2적세포반응음성;면역침정결과표명감합항체가여p185erbB2분자특이성결합;MTT비색법검측표명감합항체대과표체p185erbB2적유선암세포SKBR3적생장유억제작용.결론:CHO-dhfr-세포표체적인-서감합항체가여p185erbB2특이성결합,병가억제고표체p185erbB2적종류세포생장,표명항인p185erbB2인-서감합항체구유종류생물치료적잠재응용개치.