自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2006年
9期
1093-1100
,共8页
孙晓凤%郭琼林%胡炜%汪亚平%朱作言
孫曉鳳%郭瓊林%鬍煒%汪亞平%硃作言
손효봉%곽경림%호위%왕아평%주작언
生长激素受体(GHR)%分子克隆%转录子%表达分析%鲤鱼
生長激素受體(GHR)%分子剋隆%轉錄子%錶達分析%鯉魚
생장격소수체(GHR)%분자극륭%전록자%표체분석%리어
应用反转录-PCR及RACE技术,从二龄鲤鱼肝组织中克隆了生长激素受体(GHR)的全长基因,其开放阅读框编码602个氨基酸,其中包括244个氨基酸的胞外激素结合结构域,24个氨基酸的跨膜区域和334个氨基酸的胞内信号传导区域.序列分析表明:无论在基因水平还是蛋白质水平,鲤鱼GHR与鲫鱼GHR均具有较高的同源性.用一对基因特异性引物在研究二龄鲤鱼GHR的组织分布时发现:肝与其他组织的扩增产物大小不一致(肝组织中的约小100bp),测序结果以及基因组PCR表明这是由于一个97 bp的内含子选择性剪切造成的.而以同样引物在4月龄鲤鱼各组织扩增的片段大小是一致的,且与二龄鲤鱼肝以外组织的扩增产物大小一致.鲤鱼GHR两种转录子的出现,系转录时发生拼接变化所致,推测是一种与发育有关的机制.采用半定量RTPCR方法分析组织相对表达水平,结果显示:GHR在二龄鲤鱼鳃、胸腺、脑组织的表达水平明显低于4月龄鲤鱼.
應用反轉錄-PCR及RACE技術,從二齡鯉魚肝組織中剋隆瞭生長激素受體(GHR)的全長基因,其開放閱讀框編碼602箇氨基痠,其中包括244箇氨基痠的胞外激素結閤結構域,24箇氨基痠的跨膜區域和334箇氨基痠的胞內信號傳導區域.序列分析錶明:無論在基因水平還是蛋白質水平,鯉魚GHR與鯽魚GHR均具有較高的同源性.用一對基因特異性引物在研究二齡鯉魚GHR的組織分佈時髮現:肝與其他組織的擴增產物大小不一緻(肝組織中的約小100bp),測序結果以及基因組PCR錶明這是由于一箇97 bp的內含子選擇性剪切造成的.而以同樣引物在4月齡鯉魚各組織擴增的片段大小是一緻的,且與二齡鯉魚肝以外組織的擴增產物大小一緻.鯉魚GHR兩種轉錄子的齣現,繫轉錄時髮生拼接變化所緻,推測是一種與髮育有關的機製.採用半定量RTPCR方法分析組織相對錶達水平,結果顯示:GHR在二齡鯉魚鰓、胸腺、腦組織的錶達水平明顯低于4月齡鯉魚.
응용반전록-PCR급RACE기술,종이령리어간조직중극륭료생장격소수체(GHR)적전장기인,기개방열독광편마602개안기산,기중포괄244개안기산적포외격소결합결구역,24개안기산적과막구역화334개안기산적포내신호전도구역.서렬분석표명:무론재기인수평환시단백질수평,리어GHR여즉어GHR균구유교고적동원성.용일대기인특이성인물재연구이령리어GHR적조직분포시발현:간여기타조직적확증산물대소불일치(간조직중적약소100bp),측서결과이급기인조PCR표명저시유우일개97 bp적내함자선택성전절조성적.이이동양인물재4월령리어각조직확증적편단대소시일치적,차여이령리어간이외조직적확증산물대소일치.리어GHR량충전록자적출현,계전록시발생병접변화소치,추측시일충여발육유관적궤제.채용반정량RTPCR방법분석조직상대표체수평,결과현시:GHR재이령리어새、흉선、뇌조직적표체수평명현저우4월령리어.
