病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2007年
3期
224-229
,共6页
孙东波%冯力%陈建飞%时洪艳%佟有恩%刘胜旺%陈洪岩
孫東波%馮力%陳建飛%時洪豔%佟有恩%劉勝旺%陳洪巖
손동파%풍력%진건비%시홍염%동유은%류성왕%진홍암
猪流行性腹泻病毒%S基因%序列分析%线性抗原表位区
豬流行性腹瀉病毒%S基因%序列分析%線性抗原錶位區
저류행성복사병독%S기인%서렬분석%선성항원표위구
以猪流行性腹泻病毒CH/JL毒株的RNA为模板,通过RT-PCR扩增获得的3个相互重叠的cDNA克隆覆盖了S基因,序列比对结果表明:PEDV CH/JL株S基因与CV777、Brl/87、JS、KPEDV和Chinju99毒株S基因核苷酸序列的同源性分别为96.97%、96.87%、96.41%、94.02%和93.93%,氨基酸序列的同源性分别为96.17%、95.88%、96.10%、92.36%和92.05%;分子进化树分析结果显示,PEDV CH/JL株S基因与JS毒株S基因亲缘关系最近,处于同一群.利用DNAstar Protean程序预测了PEDV CH/JL株S蛋白一个抗原表位区(83～276aa),将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1后转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,在终浓度1.0mmol/L的IPTG诱导下获得了表达,Western blot结果显示,预测的抗原表位区GST融合蛋白能与猪流行性腹泻病毒多克隆抗血清反应,提示该抗原表位区含有线性抗原表位.
以豬流行性腹瀉病毒CH/JL毒株的RNA為模闆,通過RT-PCR擴增穫得的3箇相互重疊的cDNA剋隆覆蓋瞭S基因,序列比對結果錶明:PEDV CH/JL株S基因與CV777、Brl/87、JS、KPEDV和Chinju99毒株S基因覈苷痠序列的同源性分彆為96.97%、96.87%、96.41%、94.02%和93.93%,氨基痠序列的同源性分彆為96.17%、95.88%、96.10%、92.36%和92.05%;分子進化樹分析結果顯示,PEDV CH/JL株S基因與JS毒株S基因親緣關繫最近,處于同一群.利用DNAstar Protean程序預測瞭PEDV CH/JL株S蛋白一箇抗原錶位區(83～276aa),將其剋隆到原覈錶達載體pGEX-6p-1後轉化E.coli BL21(DE3)感受態細胞,在終濃度1.0mmol/L的IPTG誘導下穫得瞭錶達,Western blot結果顯示,預測的抗原錶位區GST融閤蛋白能與豬流行性腹瀉病毒多剋隆抗血清反應,提示該抗原錶位區含有線性抗原錶位.
이저류행성복사병독CH/JL독주적RNA위모판,통과RT-PCR확증획득적3개상호중첩적cDNA극륭복개료S기인,서렬비대결과표명:PEDV CH/JL주S기인여CV777、Brl/87、JS、KPEDV화Chinju99독주S기인핵감산서렬적동원성분별위96.97%、96.87%、96.41%、94.02%화93.93%,안기산서렬적동원성분별위96.17%、95.88%、96.10%、92.36%화92.05%;분자진화수분석결과현시,PEDV CH/JL주S기인여JS독주S기인친연관계최근,처우동일군.이용DNAstar Protean정서예측료PEDV CH/JL주S단백일개항원표위구(83～276aa),장기극륭도원핵표체재체pGEX-6p-1후전화E.coli BL21(DE3)감수태세포,재종농도1.0mmol/L적IPTG유도하획득료표체,Western blot결과현시,예측적항원표위구GST융합단백능여저류행성복사병독다극륭항혈청반응,제시해항원표위구함유선성항원표위.
