CAJ | 학술논문

通过研究建立了一种简便、高效提取螺旋藻基因组外DNA(exDNA)的方法--CTAB-蛋白酶K法.该法先以含200μg/ml蛋白酶K的CTAB提取液裂解螺旋藻细胞, 并用氯仿/异戊醇抽提得到总DNA粗提物, 粗提物再经100 μg/ml蛋白酶K酶解及酚/氯仿/异戊醇抽提得到总DNA, 再利用凝胶冻融离心法得到高纯度exDNA.利用上述方法, 对6株钝顶螺旋藻品系Sp-1、Sp-2、Sp-3、Sp-4、Sp-5和Sp-6所作的研究结果表明, (1) 6株品系均含有exDNA, 但数目与相对质量不尽相同; (2) Sp-1、Sp-2、Sp-5和Sp-6均只有一种exDNA, 依次约为1.15kb、0.75kb、1.15kb和1.1kb; (3) Sp-3和Sp-4均有2条exDNA带, Sp-3的exDNA约为1.55kb和3.0kb, Sp-4的exDNA约为1.8kb和3.6kb; (4) 螺旋藻品种(系)间exDNA的异同性及其与生理生态等特性的关系, 暗示着exDNA可能与螺旋藻的分类、进化和形态建成等重大生物学课题有关, 并有可能担负着某些生物学功能.
통과연구건립료일충간편、고효제취라선조기인조외DNA(exDNA)적방법--CTAB-단백매K법.해법선이함200μg/ml단백매K적CTAB제취액렬해라선조세포, 병용록방/이무순추제득도총DNA조제물, 조제물재경100 μg/ml단백매K매해급분/록방/이무순추제득도총DNA, 재이용응효동융리심법득도고순도exDNA.이용상술방법, 대6주둔정라선조품계Sp-1、Sp-2、Sp-3、Sp-4、Sp-5화Sp-6소작적연구결과표명, (1) 6주품계균함유exDNA, 단수목여상대질량불진상동; (2) Sp-1、Sp-2、Sp-5화Sp-6균지유일충exDNA, 의차약위1.15kb、0.75kb、1.15kb화1.1kb; (3) Sp-3화Sp-4균유2조exDNA대, Sp-3적exDNA약위1.55kb화3.0kb, Sp-4적exDNA약위1.8kb화3.6kb; (4) 라선조품충(계)간exDNA적이동성급기여생리생태등특성적관계, 암시착exDNA가능여라선조적분류、진화화형태건성등중대생물학과제유관, 병유가능담부착모사생물학공능.