实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2007年
3期
625-628
,共4页
刘志杰%张艳%余敏君%方明礼%黎村艳
劉誌傑%張豔%餘敏君%方明禮%黎村豔
류지걸%장염%여민군%방명례%려촌염
幽门螺杆菌%Lpp20%真核表达重组载体
幽門螺桿菌%Lpp20%真覈錶達重組載體
유문라간균%Lpp20%진핵표체중조재체
目的 以幽门螺杆菌外膜脂蛋白Lpp20为目的基因,构建H.pylori Lpp2基因的真核表达重组载体pcD-NA3.1(+)-Lpp20,为H. Pylori核酸疫苗的研制奠定实验基础.方法 用Primer 5.0软件分析GenBank中H.pylori外膜脂蛋白Lpp20基因序列,设计合成相应特异性引物,引入BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点,以H.pylori 26695株基因组为模板,PCR扩增Lpp20目的基因片段,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)多克隆酶切位点中,构建重组体pcDNA3.1(+)-Lpp20;通过酶切分析,PCR鉴定及测序鉴定,筛选阳性重组体.结果 以H.pylori 26695株基因组DNA为模板扩增出特异的Lpp20基因片段,大小约为528 bp;双酶切及测序鉴定证明成功构建了H. Pylori真核表达重组载体pcDNA3.1(+)-Lpp20.结论 PCR扩增得到了大小约为528 bp的H.pylori Lpp20目的基因片段;并成功构建了pcD-NA3.1(+)-Lpp20真核表达重组载体.
目的 以幽門螺桿菌外膜脂蛋白Lpp20為目的基因,構建H.pylori Lpp2基因的真覈錶達重組載體pcD-NA3.1(+)-Lpp20,為H. Pylori覈痠疫苗的研製奠定實驗基礎.方法 用Primer 5.0軟件分析GenBank中H.pylori外膜脂蛋白Lpp20基因序列,設計閤成相應特異性引物,引入BamHⅠ和XhoⅠ酶切位點,以H.pylori 26695株基因組為模闆,PCR擴增Lpp20目的基因片段,定嚮插入真覈錶達載體pcDNA3.1(+)多剋隆酶切位點中,構建重組體pcDNA3.1(+)-Lpp20;通過酶切分析,PCR鑒定及測序鑒定,篩選暘性重組體.結果 以H.pylori 26695株基因組DNA為模闆擴增齣特異的Lpp20基因片段,大小約為528 bp;雙酶切及測序鑒定證明成功構建瞭H. Pylori真覈錶達重組載體pcDNA3.1(+)-Lpp20.結論 PCR擴增得到瞭大小約為528 bp的H.pylori Lpp20目的基因片段;併成功構建瞭pcD-NA3.1(+)-Lpp20真覈錶達重組載體.
목적 이유문라간균외막지단백Lpp20위목적기인,구건H.pylori Lpp2기인적진핵표체중조재체pcD-NA3.1(+)-Lpp20,위H. Pylori핵산역묘적연제전정실험기출.방법 용Primer 5.0연건분석GenBank중H.pylori외막지단백Lpp20기인서렬,설계합성상응특이성인물,인입BamHⅠ화XhoⅠ매절위점,이H.pylori 26695주기인조위모판,PCR확증Lpp20목적기인편단,정향삽입진핵표체재체pcDNA3.1(+)다극륭매절위점중,구건중조체pcDNA3.1(+)-Lpp20;통과매절분석,PCR감정급측서감정,사선양성중조체.결과 이H.pylori 26695주기인조DNA위모판확증출특이적Lpp20기인편단,대소약위528 bp;쌍매절급측서감정증명성공구건료H. Pylori진핵표체중조재체pcDNA3.1(+)-Lpp20.결론 PCR확증득도료대소약위528 bp적H.pylori Lpp20목적기인편단;병성공구건료pcD-NA3.1(+)-Lpp20진핵표체중조재체.
