中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2008年
2期
110-112,118
,共4页
李英辉%赵亚%刘忠湘%黄豫晓%毛张翔%薛采芳
李英輝%趙亞%劉忠湘%黃豫曉%毛張翔%薛採芳
리영휘%조아%류충상%황예효%모장상%설채방
伯氏疟原虫%T细胞免疫调节蛋白%原核表达
伯氏瘧原蟲%T細胞免疫調節蛋白%原覈錶達
백씨학원충%T세포면역조절단백%원핵표체
目的 克隆伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白(PbTIP)类似基因,原核表达PbTIP重组蛋白,并制备其抗血清.方法 在GenBank中检索PbTIP类似基因序列,设计特异性引物,从伯氏疟原虫ANKA株扩增获得该基因cDNA片段,克隆人原核表达载体pGEX4T-1并转化大肠埃希菌BL21(DE3).经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)鉴定重组蛋白.用重组蛋白GST-PbTIP包涵体免疫BALB/c小鼠,以间接荧光抗体试验(IFAT)和Western blotting鉴定产生的抗体.结果 获得了纯化的重组蛋白GST-PbTIP及其相应抗体,该抗体可以识别相对分子质量(Mr)约为60000的伯氏疟原虫感染红细胞内的PbTIP蛋白.结论 获得PbTIP重组蛋白及其相应抗体.
目的 剋隆伯氏瘧原蟲T細胞免疫調節蛋白(PbTIP)類似基因,原覈錶達PbTIP重組蛋白,併製備其抗血清.方法 在GenBank中檢索PbTIP類似基因序列,設計特異性引物,從伯氏瘧原蟲ANKA株擴增穫得該基因cDNA片段,剋隆人原覈錶達載體pGEX4T-1併轉化大腸埃希菌BL21(DE3).經異丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達,十二烷基硫痠鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和蛋白質印跡(Western blotting)鑒定重組蛋白.用重組蛋白GST-PbTIP包涵體免疫BALB/c小鼠,以間接熒光抗體試驗(IFAT)和Western blotting鑒定產生的抗體.結果 穫得瞭純化的重組蛋白GST-PbTIP及其相應抗體,該抗體可以識彆相對分子質量(Mr)約為60000的伯氏瘧原蟲感染紅細胞內的PbTIP蛋白.結論 穫得PbTIP重組蛋白及其相應抗體.
목적 극륭백씨학원충T세포면역조절단백(PbTIP)유사기인,원핵표체PbTIP중조단백,병제비기항혈청.방법 재GenBank중검색PbTIP유사기인서렬,설계특이성인물,종백씨학원충ANKA주확증획득해기인cDNA편단,극륭인원핵표체재체pGEX4T-1병전화대장애희균BL21(DE3).경이병기-β-D류대반유당감(IPTG)유도표체,십이완기류산납취병희선알응효전영(SDS-PAGE)화단백질인적(Western blotting)감정중조단백.용중조단백GST-PbTIP포함체면역BALB/c소서,이간접형광항체시험(IFAT)화Western blotting감정산생적항체.결과 획득료순화적중조단백GST-PbTIP급기상응항체,해항체가이식별상대분자질량(Mr)약위60000적백씨학원충감염홍세포내적PbTIP단백.결론 획득PbTIP중조단백급기상응항체.
