中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2009年
9期
780-782
,共3页
转化生长因子β1%RNA干扰%肺成纤维细胞%肺纤维化%基因治疗
轉化生長因子β1%RNA榦擾%肺成纖維細胞%肺纖維化%基因治療
전화생장인자β1%RNA간우%폐성섬유세포%폐섬유화%기인치료
目的:观察构建成功的三个针对人转化生长因子β1(TGF-β1)的小发夹RNA(shRNA)真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达.方法:将真核表达载体psiSTRIKE-RNAi1、psiSTRIKE-RNAi2、psiSTRIKE-RNAi3和对应的阴性对照载体经酶切鉴定和测序分析后,以Lipofectamine2000介导转染人肺成纤维细胞,48小时后应用实时荧光定量PCR检测人肺成纤维细胞TGF-β1 mRNA的表达并用ELISA检测细胞上清液中TGF-β1蛋白质的浓度.结果:重组质粒经酶切和DNA测序证实插入片段的碱基序列与预期设计一致.转染组细胞TGF-β1表达受到明显抑制,以psiSTRIKE-RNAi2的抑制效应最为显著(P＜0.01).结论:三个针对TGF-β1shRNA的重组质粒均能抑制TGF-β1在人肺成纤维细胞中的表达.
目的:觀察構建成功的三箇針對人轉化生長因子β1(TGF-β1)的小髮夾RNA(shRNA)真覈錶達質粒抑製人肺成纖維細胞TGF-β1的錶達.方法:將真覈錶達載體psiSTRIKE-RNAi1、psiSTRIKE-RNAi2、psiSTRIKE-RNAi3和對應的陰性對照載體經酶切鑒定和測序分析後,以Lipofectamine2000介導轉染人肺成纖維細胞,48小時後應用實時熒光定量PCR檢測人肺成纖維細胞TGF-β1 mRNA的錶達併用ELISA檢測細胞上清液中TGF-β1蛋白質的濃度.結果:重組質粒經酶切和DNA測序證實插入片段的堿基序列與預期設計一緻.轉染組細胞TGF-β1錶達受到明顯抑製,以psiSTRIKE-RNAi2的抑製效應最為顯著(P＜0.01).結論:三箇針對TGF-β1shRNA的重組質粒均能抑製TGF-β1在人肺成纖維細胞中的錶達.
목적:관찰구건성공적삼개침대인전화생장인자β1(TGF-β1)적소발협RNA(shRNA)진핵표체질립억제인폐성섬유세포TGF-β1적표체.방법:장진핵표체재체psiSTRIKE-RNAi1、psiSTRIKE-RNAi2、psiSTRIKE-RNAi3화대응적음성대조재체경매절감정화측서분석후,이Lipofectamine2000개도전염인폐성섬유세포,48소시후응용실시형광정량PCR검측인폐성섬유세포TGF-β1 mRNA적표체병용ELISA검측세포상청액중TGF-β1단백질적농도.결과:중조질립경매절화DNA측서증실삽입편단적감기서렬여예기설계일치.전염조세포TGF-β1표체수도명현억제,이psiSTRIKE-RNAi2적억제효응최위현저(P＜0.01).결론:삼개침대TGF-β1shRNA적중조질립균능억제TGF-β1재인폐성섬유세포중적표체.
