南通大学学报（医学版）
南通大學學報（醫學版）
남통대학학보（의학판）
JOURNAL OF NANTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2009年
4期
235-238,241
,共5页
绿色荧光蛋白%葡萄糖调节蛋白78%原核表达%蛋白标记
綠色熒光蛋白%葡萄糖調節蛋白78%原覈錶達%蛋白標記
록색형광단백%포도당조절단백78%원핵표체%단백표기
目的:应用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)来标记葡萄糖凋节蛋白78(GRF78),从而研究其与免疫细胞结合的情况.方法:通过在原核表达的GRP78的C末端连接一个EGFP来显示跟踪该蛋白的表达,进而通过流式细胞仪检测该蛋白同小鼠脾脏免疫细胞结合的情况.结果:GRP-EGFP融合蛋白分子量为126 kD,Western Blot证实该蛋白表达正确,并且表达GRP78-EGFP的BL21菌在紫外光激发下发射出强烈的绿色荧光;与EGFP单体相比较,GRP78-EGFP主要与中性粒细胞相结合,其平均结合率为5.15%.结论:绿色荧光蛋白标记的GRP78蛋白在原核中的表达具有天然构象并能发挥标记目的蛋白的作用.
目的:應用增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)來標記葡萄糖凋節蛋白78(GRF78),從而研究其與免疫細胞結閤的情況.方法:通過在原覈錶達的GRP78的C末耑連接一箇EGFP來顯示跟蹤該蛋白的錶達,進而通過流式細胞儀檢測該蛋白同小鼠脾髒免疫細胞結閤的情況.結果:GRP-EGFP融閤蛋白分子量為126 kD,Western Blot證實該蛋白錶達正確,併且錶達GRP78-EGFP的BL21菌在紫外光激髮下髮射齣彊烈的綠色熒光;與EGFP單體相比較,GRP78-EGFP主要與中性粒細胞相結閤,其平均結閤率為5.15%.結論:綠色熒光蛋白標記的GRP78蛋白在原覈中的錶達具有天然構象併能髮揮標記目的蛋白的作用.
목적:응용증강형록색형광단백(EGFP)래표기포도당조절단백78(GRF78),종이연구기여면역세포결합적정황.방법:통과재원핵표체적GRP78적C말단련접일개EGFP래현시근종해단백적표체,진이통과류식세포의검측해단백동소서비장면역세포결합적정황.결과:GRP-EGFP융합단백분자량위126 kD,Western Blot증실해단백표체정학,병차표체GRP78-EGFP적BL21균재자외광격발하발사출강렬적록색형광;여EGFP단체상비교,GRP78-EGFP주요여중성립세포상결합,기평균결합솔위5.15%.결론:록색형광단백표기적GRP78단백재원핵중적표체구유천연구상병능발휘표기목적단백적작용.
