CAJ | 학술논문

为获得高效表达犬流感病毒(CIV)HA和NA抗原的疫苗株,本实验通过反向遗传操作技术将A/canine/Zhejiang/01/2010 (H3N2)犬流感病毒(简称ZJCIV)的HA和NA基因与A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒(PR8)的6个内部基因进行重组,拯救并获得了一株重组病毒CIV-PR8.分别用含100 EID50的CIV-PR8和ZJCIV感染SPF鸡胚,含2×103 TCID50的CIV-PR8和ZJCIV感染MDCK细胞,不同时间段取病毒样品测定血凝效价和TCID50值.两者比较表明,CIV-PR8分别在接种后36 h和48 h时血凝效价达到峰值,鸡胚尿液中效价可达210,为野生病毒株的16倍；细胞上清血凝价可达28,为野生病毒株的4倍；病毒增殖曲线表明通过鸡胚扩增和细胞扩增,CIV-PR8的滴度均高于野生病毒株ZJCIV.结果表明,拯救的CIV-PR8增殖能力明显高于野生病毒株ZJCIV,该重组病毒有望成为犬流感疫苗研制的候选病毒株.
위획득고효표체견류감병독(CIV)HA화NA항원적역묘주,본실험통과반향유전조작기술장A/canine/Zhejiang/01/2010 (H3N2)견류감병독(간칭ZJCIV)적HA화NA기인여A/Puerto Rico/8/34(H1N1)병독(PR8)적6개내부기인진행중조,증구병획득료일주중조병독CIV-PR8.분별용함100 EID50적CIV-PR8화ZJCIV감염SPF계배,함2×103 TCID50적CIV-PR8화ZJCIV감염MDCK세포,불동시간단취병독양품측정혈응효개화TCID50치.량자비교표명,CIV-PR8분별재접충후36 h화48 h시혈응효개체도봉치,계배뇨액중효개가체210,위야생병독주적16배；세포상청혈응개가체28,위야생병독주적4배；병독증식곡선표명통과계배확증화세포확증,CIV-PR8적적도균고우야생병독주ZJCIV.결과표명,증구적CIV-PR8증식능력명현고우야생병독주ZJCIV,해중조병독유망성위견류감역묘연제적후선병독주.