中华妇产科杂志
中華婦產科雜誌
중화부산과잡지
CHINESE JOUNAL OF OBSTETRICS AND GYNECOLOGY
2006年
8期
549-553
,共5页
杨培丽%刘玉环%崔英%蔡在龙%毛积芳
楊培麗%劉玉環%崔英%蔡在龍%毛積芳
양배려%류옥배%최영%채재룡%모적방
磷酸单酯水解酶类%肿瘤抑制蛋白质类%腺病毒科%子宫内膜肿瘤%细胞凋亡
燐痠單酯水解酶類%腫瘤抑製蛋白質類%腺病毒科%子宮內膜腫瘤%細胞凋亡
린산단지수해매류%종류억제단백질류%선병독과%자궁내막종류%세포조망
目的 研究外源性PTEN cDNA的表达对子宫内膜癌细胞凋亡的影响.方法 用细菌内同源重组法构建含野生型抑癌基因PTEN cDNA的复制缺陷型腺病毒Ad-PTEN,蛋白印迹法鉴定转染Ad-PTEN后,子宫内膜癌细胞系RL95-2细胞中PTEN蛋白的表达.将RL95-2细胞随机分成3组:(1)空白对照组:仅用培养基而不加腺病毒;(2)Ad-CMV组:转染复制缺陷型空载体腺病毒Ad-CMV;(3)Ad-PTEN组:转染复制缺陷型腺病毒Ad-PTEN.前两组均为对照组.采用细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻检测、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)测定及染色体DNA片段化检测这3种方法,从不同角度检测PTEN蛋白的表达对RL95-2细胞凋亡的影响.结果 经Ad-PTEN介导的PTENcDNA能够在RL95-2细胞中持续有效地表达.Ad-PTEN组转染后24、48、72、96 h,RL95-2细胞中细胞膜PS外翻细胞分别占(6.09±1.01)%、(9.98±2.17)%、(11.74±2.65)%、(27.69±8.67)%,各个时间点分别与两个对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);RL95-2细胞中活化caspase-3细胞分别占(2.6±0.5)%、(18.0±4.4)%、(21.8±5.1)%、(33.7±9.9)%,各个时间点分别与两个对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).Ad-PTEN转染后48 h,RL95-2细胞中出现特异性的染色体DNA梯状条带.结论 腺病毒介导的PTEN cDNA能够有效地在RL95-2细胞中表达,并诱导其凋亡,为子宫内膜癌的基因治疗提供了理论基础.
目的 研究外源性PTEN cDNA的錶達對子宮內膜癌細胞凋亡的影響.方法 用細菌內同源重組法構建含野生型抑癌基因PTEN cDNA的複製缺陷型腺病毒Ad-PTEN,蛋白印跡法鑒定轉染Ad-PTEN後,子宮內膜癌細胞繫RL95-2細胞中PTEN蛋白的錶達.將RL95-2細胞隨機分成3組:(1)空白對照組:僅用培養基而不加腺病毒;(2)Ad-CMV組:轉染複製缺陷型空載體腺病毒Ad-CMV;(3)Ad-PTEN組:轉染複製缺陷型腺病毒Ad-PTEN.前兩組均為對照組.採用細胞膜燐脂酰絲氨痠(PS)外翻檢測、活化半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3(caspase-3)測定及染色體DNA片段化檢測這3種方法,從不同角度檢測PTEN蛋白的錶達對RL95-2細胞凋亡的影響.結果 經Ad-PTEN介導的PTENcDNA能夠在RL95-2細胞中持續有效地錶達.Ad-PTEN組轉染後24、48、72、96 h,RL95-2細胞中細胞膜PS外翻細胞分彆佔(6.09±1.01)%、(9.98±2.17)%、(11.74±2.65)%、(27.69±8.67)%,各箇時間點分彆與兩箇對照組比較,差異均有統計學意義(P＜0.05);RL95-2細胞中活化caspase-3細胞分彆佔(2.6±0.5)%、(18.0±4.4)%、(21.8±5.1)%、(33.7±9.9)%,各箇時間點分彆與兩箇對照組比較,差異均有統計學意義(P＜0.05).Ad-PTEN轉染後48 h,RL95-2細胞中齣現特異性的染色體DNA梯狀條帶.結論 腺病毒介導的PTEN cDNA能夠有效地在RL95-2細胞中錶達,併誘導其凋亡,為子宮內膜癌的基因治療提供瞭理論基礎.
목적 연구외원성PTEN cDNA적표체대자궁내막암세포조망적영향.방법 용세균내동원중조법구건함야생형억암기인PTEN cDNA적복제결함형선병독Ad-PTEN,단백인적법감정전염Ad-PTEN후,자궁내막암세포계RL95-2세포중PTEN단백적표체.장RL95-2세포수궤분성3조:(1)공백대조조:부용배양기이불가선병독;(2)Ad-CMV조:전염복제결함형공재체선병독Ad-CMV;(3)Ad-PTEN조:전염복제결함형선병독Ad-PTEN.전량조균위대조조.채용세포막린지선사안산(PS)외번검측、활화반광안산천동안산단백매3(caspase-3)측정급염색체DNA편단화검측저3충방법,종불동각도검측PTEN단백적표체대RL95-2세포조망적영향.결과 경Ad-PTEN개도적PTENcDNA능구재RL95-2세포중지속유효지표체.Ad-PTEN조전염후24、48、72、96 h,RL95-2세포중세포막PS외번세포분별점(6.09±1.01)%、(9.98±2.17)%、(11.74±2.65)%、(27.69±8.67)%,각개시간점분별여량개대조조비교,차이균유통계학의의(P＜0.05);RL95-2세포중활화caspase-3세포분별점(2.6±0.5)%、(18.0±4.4)%、(21.8±5.1)%、(33.7±9.9)%,각개시간점분별여량개대조조비교,차이균유통계학의의(P＜0.05).Ad-PTEN전염후48 h,RL95-2세포중출현특이성적염색체DNA제상조대.결론 선병독개도적PTEN cDNA능구유효지재RL95-2세포중표체,병유도기조망,위자궁내막암적기인치료제공료이론기출.
