实验生物学报
實驗生物學報
실험생물학보
ACTA BIOLOGIAE EXPERIMENTLIS SINICA
2002年
4期
278-282
,共5页
陈建泉%潘勇%赵建阳%曹莹莹%徐旭俊%周汝江%张锁林%王述宇%成国祥
陳建泉%潘勇%趙建暘%曹瑩瑩%徐旭俊%週汝江%張鎖林%王述宇%成國祥
진건천%반용%조건양%조형형%서욱준%주여강%장쇄림%왕술우%성국상
核移植%波尔山羊%萨能奶山羊%胎儿成纤维细胞%颗粒细胞%皮肤成纤维细胞
覈移植%波爾山羊%薩能奶山羊%胎兒成纖維細胞%顆粒細胞%皮膚成纖維細胞
핵이식%파이산양%살능내산양%태인성섬유세포%과립세포%피부성섬유세포
萨能奶山羊是著名的奶用山羊品种,波尔山羊则是世界著名的肉用山羊品种.为了研究波尔山羊体细胞在奶山羊卵母细胞中的去分化,我们将成年波尔山羊的颗粒细胞或耳皮肤成纤维细胞作为供核细胞(试验组),移入奶山羊中Ⅱ期的去核卵母细胞透明带下,经电融合和离子霉素与6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)激活,直接移入同期发情奶山羊输卵管或经体内培养,将发育的重构胚移人同期发情羊子宫内.妊娠早期作B超诊断,确立妊娠的观察至足月.同时将奶山羊的35日龄胎儿成纤维细胞作供核细胞(对照组),按试验组同样方法处理,将重构胚直接移入同期发情的奶山羊输卵管内.结果:试验组,波尔羊颗粒粒细胞与耳皮肤成纤维细胞的融合率分别为78.2%(115/147)、57.4%(116/202),重构胚卵裂率为85.8%(115/134),桑椹胚、囊胚的发育率38.8%(52/134),早期妊娠三头,分别于妊娠40、60、60日龄终止妊娠.对照组,融合率为89.5%(136/152),早期妊娠率为42.9%(6/14),四头受体足月分娩,产四头公羊羔,其中三头存活,一头分娩时死于肺不扩张,并体重过大,显示胎儿过大综合症.经基因型鉴定证实,这四头克隆羔羊均源于同一胎儿成纤维细胞系.以上结果表明,波尔羊体细胞核在奶山羊卵母细胞中能够去分化,并维持一定程度的发育.
薩能奶山羊是著名的奶用山羊品種,波爾山羊則是世界著名的肉用山羊品種.為瞭研究波爾山羊體細胞在奶山羊卵母細胞中的去分化,我們將成年波爾山羊的顆粒細胞或耳皮膚成纖維細胞作為供覈細胞(試驗組),移入奶山羊中Ⅱ期的去覈卵母細胞透明帶下,經電融閤和離子黴素與6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)激活,直接移入同期髮情奶山羊輸卵管或經體內培養,將髮育的重構胚移人同期髮情羊子宮內.妊娠早期作B超診斷,確立妊娠的觀察至足月.同時將奶山羊的35日齡胎兒成纖維細胞作供覈細胞(對照組),按試驗組同樣方法處理,將重構胚直接移入同期髮情的奶山羊輸卵管內.結果:試驗組,波爾羊顆粒粒細胞與耳皮膚成纖維細胞的融閤率分彆為78.2%(115/147)、57.4%(116/202),重構胚卵裂率為85.8%(115/134),桑椹胚、囊胚的髮育率38.8%(52/134),早期妊娠三頭,分彆于妊娠40、60、60日齡終止妊娠.對照組,融閤率為89.5%(136/152),早期妊娠率為42.9%(6/14),四頭受體足月分娩,產四頭公羊羔,其中三頭存活,一頭分娩時死于肺不擴張,併體重過大,顯示胎兒過大綜閤癥.經基因型鑒定證實,這四頭剋隆羔羊均源于同一胎兒成纖維細胞繫.以上結果錶明,波爾羊體細胞覈在奶山羊卵母細胞中能夠去分化,併維持一定程度的髮育.
살능내산양시저명적내용산양품충,파이산양칙시세계저명적육용산양품충.위료연구파이산양체세포재내산양란모세포중적거분화,아문장성년파이산양적과립세포혹이피부성섬유세포작위공핵세포(시험조),이입내산양중Ⅱ기적거핵란모세포투명대하,경전융합화리자매소여6-이갑기안기표령(6-DMAP)격활,직접이입동기발정내산양수란관혹경체내배양,장발육적중구배이인동기발정양자궁내.임신조기작B초진단,학립임신적관찰지족월.동시장내산양적35일령태인성섬유세포작공핵세포(대조조),안시험조동양방법처리,장중구배직접이입동기발정적내산양수란관내.결과:시험조,파이양과립립세포여이피부성섬유세포적융합솔분별위78.2%(115/147)、57.4%(116/202),중구배란렬솔위85.8%(115/134),상심배、낭배적발육솔38.8%(52/134),조기임신삼두,분별우임신40、60、60일령종지임신.대조조,융합솔위89.5%(136/152),조기임신솔위42.9%(6/14),사두수체족월분면,산사두공양고,기중삼두존활,일두분면시사우폐불확장,병체중과대,현시태인과대종합증.경기인형감정증실,저사두극륭고양균원우동일태인성섬유세포계.이상결과표명,파이양체세포핵재내산양란모세포중능구거분화,병유지일정정도적발육.
