中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2007年
2期
259-263
,共5页
郭慧%冯德云%李波%何琼琼%孙树艳%程瑞雪
郭慧%馮德雲%李波%何瓊瓊%孫樹豔%程瑞雪
곽혜%풍덕운%리파%하경경%손수염%정서설
丙型肝炎病毒%信号交流%肝细胞%信号转导
丙型肝炎病毒%信號交流%肝細胞%信號轉導
병형간염병독%신호교류%간세포%신호전도
目的:研究表达丙型肝炎病毒非结构蛋白3(hepatitis C virus non-structural protein 3, HCV NS3)的肝细胞中细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)与核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)信号转导通路间的cross-talk.方法:真核表达质粒pcDNA3.1-NS3转染人源永生化肝细胞系QSG7701,建立稳定表达HCV NS3蛋白的细胞株QSG7701/NS3.在丝裂原活化蛋白激酶的激酶(MAP kinase kinase, MEK)抑制剂PD98059(0,30,50,100μmol/L)处理细胞QSG7701/NS3前后,利用Western免疫印迹检测ERK的磷酸化水平及细胞周期素D1(cyclin D1)蛋白的表达;凝胶电泳阻滞迁移试验检测转录激活因子1(activator protrin 1, AP-1)、NF-κB等转录因子活性的改变;流式细胞术检测细胞周期各期百分数的改变;MTT比色法观察其对细胞增殖的影响.结果:HCV NS3蛋白能上调QSG7701细胞的ERK磷酸化水平及cyclin D1的表达水平;PD98059抑制HCV NS3蛋白介导的细胞增殖,下调AP-1和NF-κB的活性及cyclin D1的表达.结论:在表达HCV NS3蛋白的肝细胞中,ERK抑制剂能抑制肝细胞增殖,并呈明显的剂量依赖关系.ERK与NF-κB信号转导通路间可能存在cross-talk,并在肝细胞的增殖和恶性转化中发挥协同作用.
目的:研究錶達丙型肝炎病毒非結構蛋白3(hepatitis C virus non-structural protein 3, HCV NS3)的肝細胞中細胞外信號調節激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)與覈因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)信號轉導通路間的cross-talk.方法:真覈錶達質粒pcDNA3.1-NS3轉染人源永生化肝細胞繫QSG7701,建立穩定錶達HCV NS3蛋白的細胞株QSG7701/NS3.在絲裂原活化蛋白激酶的激酶(MAP kinase kinase, MEK)抑製劑PD98059(0,30,50,100μmol/L)處理細胞QSG7701/NS3前後,利用Western免疫印跡檢測ERK的燐痠化水平及細胞週期素D1(cyclin D1)蛋白的錶達;凝膠電泳阻滯遷移試驗檢測轉錄激活因子1(activator protrin 1, AP-1)、NF-κB等轉錄因子活性的改變;流式細胞術檢測細胞週期各期百分數的改變;MTT比色法觀察其對細胞增殖的影響.結果:HCV NS3蛋白能上調QSG7701細胞的ERK燐痠化水平及cyclin D1的錶達水平;PD98059抑製HCV NS3蛋白介導的細胞增殖,下調AP-1和NF-κB的活性及cyclin D1的錶達.結論:在錶達HCV NS3蛋白的肝細胞中,ERK抑製劑能抑製肝細胞增殖,併呈明顯的劑量依賴關繫.ERK與NF-κB信號轉導通路間可能存在cross-talk,併在肝細胞的增殖和噁性轉化中髮揮協同作用.
목적:연구표체병형간염병독비결구단백3(hepatitis C virus non-structural protein 3, HCV NS3)적간세포중세포외신호조절격매(extracellular signal-regulated kinase, ERK)여핵인자κB(nuclear factor κB,NF-κB)신호전도통로간적cross-talk.방법:진핵표체질립pcDNA3.1-NS3전염인원영생화간세포계QSG7701,건립은정표체HCV NS3단백적세포주QSG7701/NS3.재사렬원활화단백격매적격매(MAP kinase kinase, MEK)억제제PD98059(0,30,50,100μmol/L)처리세포QSG7701/NS3전후,이용Western면역인적검측ERK적린산화수평급세포주기소D1(cyclin D1)단백적표체;응효전영조체천이시험검측전록격활인자1(activator protrin 1, AP-1)、NF-κB등전록인자활성적개변;류식세포술검측세포주기각기백분수적개변;MTT비색법관찰기대세포증식적영향.결과:HCV NS3단백능상조QSG7701세포적ERK린산화수평급cyclin D1적표체수평;PD98059억제HCV NS3단백개도적세포증식,하조AP-1화NF-κB적활성급cyclin D1적표체.결론:재표체HCV NS3단백적간세포중,ERK억제제능억제간세포증식,병정명현적제량의뢰관계.ERK여NF-κB신호전도통로간가능존재cross-talk,병재간세포적증식화악성전화중발휘협동작용.
