西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2008年
12期
2423-2428
,共6页
陈永芳%芦韦华%王芳%麻浩%李建贵
陳永芳%蘆韋華%王芳%痳浩%李建貴
진영방%호위화%왕방%마호%리건귀
新疆紫草%发根农杆菌%毛状根%PCR检测
新疆紫草%髮根農桿菌%毛狀根%PCR檢測
신강자초%발근농간균%모상근%PCR검측
将处于对数生长期(A600为0.5)的发根农杆菌MSU440、A4、R1000、15834、1025和R1601与新疆紫草子叶外植体共培养.结果表明:(1)发根农杆菌不同菌种对转化率有显著影响,供试6个菌种中只有MSU440菌株获得转化株.PCR及序列分析表明发根农杆菌Ri质粒的rolC基因已在新疆紫草毛状根基因组中整合并得到表达,转化率达4.5%.(2)子叶较真叶的不定根发生率高,且生根持续时间长.(3)在B5无铵无激素固体培养基上,毛状根分支多且根较长,达2～3 cm,毛状根鲜重月平均增殖达7～9倍,是固体培养毛状根的适宜培养基.(4)毛状根在MS无铵无激素液体培养基中培养12 d时,毛状根鲜重平均增殖达12倍,MS无铵液体培养基有利于毛状根的扩大生产.首次获得了激素自主、快速伸长生长、多分支、多根毛的新疆紫草毛状根株系,初步建立了新疆紫草毛状根诱导体系,为大规模培养、生产紫草素奠定了基础.
將處于對數生長期(A600為0.5)的髮根農桿菌MSU440、A4、R1000、15834、1025和R1601與新疆紫草子葉外植體共培養.結果錶明:(1)髮根農桿菌不同菌種對轉化率有顯著影響,供試6箇菌種中隻有MSU440菌株穫得轉化株.PCR及序列分析錶明髮根農桿菌Ri質粒的rolC基因已在新疆紫草毛狀根基因組中整閤併得到錶達,轉化率達4.5%.(2)子葉較真葉的不定根髮生率高,且生根持續時間長.(3)在B5無銨無激素固體培養基上,毛狀根分支多且根較長,達2～3 cm,毛狀根鮮重月平均增殖達7～9倍,是固體培養毛狀根的適宜培養基.(4)毛狀根在MS無銨無激素液體培養基中培養12 d時,毛狀根鮮重平均增殖達12倍,MS無銨液體培養基有利于毛狀根的擴大生產.首次穫得瞭激素自主、快速伸長生長、多分支、多根毛的新疆紫草毛狀根株繫,初步建立瞭新疆紫草毛狀根誘導體繫,為大規模培養、生產紫草素奠定瞭基礎.
장처우대수생장기(A600위0.5)적발근농간균MSU440、A4、R1000、15834、1025화R1601여신강자초자협외식체공배양.결과표명:(1)발근농간균불동균충대전화솔유현저영향,공시6개균충중지유MSU440균주획득전화주.PCR급서렬분석표명발근농간균Ri질립적rolC기인이재신강자초모상근기인조중정합병득도표체,전화솔체4.5%.(2)자협교진협적불정근발생솔고,차생근지속시간장.(3)재B5무안무격소고체배양기상,모상근분지다차근교장,체2～3 cm,모상근선중월평균증식체7～9배,시고체배양모상근적괄의배양기.(4)모상근재MS무안무격소액체배양기중배양12 d시,모상근선중평균증식체12배,MS무안액체배양기유리우모상근적확대생산.수차획득료격소자주、쾌속신장생장、다분지、다근모적신강자초모상근주계,초보건립료신강자초모상근유도체계,위대규모배양、생산자초소전정료기출.
