茶树花青素还原酶基因在大肠杆菌中的表达及优化
다수화청소환원매기인재대장간균중적표체급우화
Expression and Optimization of Anthocyanin Reductase Gene of Tea Plant [Camellia sinensis (L.) O.Kuntze] in Escherichia coli
  • 万方数据
    茶叶科学 다협과학

    2011年 4期 326-332 ,共7页

    骆洋%王弘雪%王云生%卢忠尉%刘亚军%单育%陈啸天%叶辉%高丽萍%夏涛

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    茶树%花青素还原酶%原核表达%酶活性 茶樹%花青素還原酶%原覈錶達%酶活性
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    茶树花青素还原酶是催化非酯型儿茶素EC和EGC合成的关键酶.采用RT-PCR技术,获得了茶树花青素还原酶基因的开放阅读框,它编码含337个氨基酸的蛋白质,推测分子量为37 kD,等电点为6.54;成功地将该基因重组到表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌rosetta中进行原核表达;优化了原核表达中诱导时间、诱导温度、IPTG浓度、氨苄青霉素浓度,纯化出目的蛋白.HPLC检测表明,目的蛋白具有ANR酶活性.
    다수화청소환원매시최화비지형인다소EC화EGC합성적관건매.채용RT-PCR기술,획득료다수화청소환원매기인적개방열독광,타편마함337개안기산적단백질,추측분자량위37 kD,등전점위6.54;성공지장해기인중조도표체재체pET32a(+)상,병재대장간균rosetta중진행원핵표체;우화료원핵표체중유도시간、유도온도、IPTG농도、안변청매소농도,순화출목적단백.HPLC검측표명,목적단백구유ANR매활성.
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