微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2004年
1期
79-82
,共4页
阎浩林%何汉洲%蔡苏兰%王琦
閻浩林%何漢洲%蔡囌蘭%王琦
염호림%하한주%채소란%왕기
硫酸软骨素%硫酸软骨素酶%温和气单胞菌%胞外酶
硫痠軟骨素%硫痠軟骨素酶%溫和氣單胞菌%胞外酶
류산연골소%류산연골소매%온화기단포균%포외매
利用平板快速筛选法,从鱼腹中筛选到一株产生硫酸软骨素酶的细菌YH311,通过生物特性和生化反应试验考察,初步鉴定为温和气单胞菌(Aeromonas sobria).培养至36h时,该菌株产酶达到高峰期,培养液的酶活力达0.9U/mL.利用超声波破碎菌体细胞,分别测定培养液和菌体细胞的酶活力,发现培养液的酶活力要远远大于菌体细胞的酶活力,显示该酶为分泌型表达,属于胞外酶.发酵液经离心后,上清液用硫酸铵分级沉淀,再分别经过CM-Cellulose、QAE-sephadex A50和Sephadex G-150层析柱进行逐级分纯,并跟踪酶活,最后获得硫酸软骨素酶.SDS-PAGE检测为单一条带,其分子量约为80kD.
利用平闆快速篩選法,從魚腹中篩選到一株產生硫痠軟骨素酶的細菌YH311,通過生物特性和生化反應試驗攷察,初步鑒定為溫和氣單胞菌(Aeromonas sobria).培養至36h時,該菌株產酶達到高峰期,培養液的酶活力達0.9U/mL.利用超聲波破碎菌體細胞,分彆測定培養液和菌體細胞的酶活力,髮現培養液的酶活力要遠遠大于菌體細胞的酶活力,顯示該酶為分泌型錶達,屬于胞外酶.髮酵液經離心後,上清液用硫痠銨分級沉澱,再分彆經過CM-Cellulose、QAE-sephadex A50和Sephadex G-150層析柱進行逐級分純,併跟蹤酶活,最後穫得硫痠軟骨素酶.SDS-PAGE檢測為單一條帶,其分子量約為80kD.
이용평판쾌속사선법,종어복중사선도일주산생류산연골소매적세균YH311,통과생물특성화생화반응시험고찰,초보감정위온화기단포균(Aeromonas sobria).배양지36h시,해균주산매체도고봉기,배양액적매활력체0.9U/mL.이용초성파파쇄균체세포,분별측정배양액화균체세포적매활력,발현배양액적매활력요원원대우균체세포적매활력,현시해매위분비형표체,속우포외매.발효액경리심후,상청액용류산안분급침정,재분별경과CM-Cellulose、QAE-sephadex A50화Sephadex G-150층석주진행축급분순,병근종매활,최후획득류산연골소매.SDS-PAGE검측위단일조대,기분자량약위80kD.
