微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2004年
4期
483-486
,共4页
王海燕%秦浚川%王敖全%唐国敏
王海燕%秦浚川%王敖全%唐國敏
왕해연%진준천%왕오전%당국민
酸性α-淀粉酶%糖化酶%分泌表达%双功能酒精酵母
痠性α-澱粉酶%糖化酶%分泌錶達%雙功能酒精酵母
산성α-정분매%당화매%분비표체%쌍공능주정효모
用PCR合成的黑曲霉(Aspergillus niger)酸性α-淀粉酶(Acid α-amylase)的cDNA,构建了由酵母醇脱氢酶(ADH1)启动子和终止子引导表达,酸性α-淀粉酶自身信号肽序列引导分泌的表达元件,与黑曲霉糖化酶cDNA的表达元件同时插入由酵母rDNA序列引导同源整合的酵母YIp型表达载体pWHY中,构成双基因表达分泌质粒pWAG.采用pWAG与酵母YEp型G418抗性表达质粒的共转化,将两个基因表达元件整合到酒精生产酵母菌株AS2.346的染色体rDNA序列中,获得同时表达胞外酸性α-淀粉酶和糖化酶的双功能酒精酵母工程菌.
用PCR閤成的黑麯黴(Aspergillus niger)痠性α-澱粉酶(Acid α-amylase)的cDNA,構建瞭由酵母醇脫氫酶(ADH1)啟動子和終止子引導錶達,痠性α-澱粉酶自身信號肽序列引導分泌的錶達元件,與黑麯黴糖化酶cDNA的錶達元件同時插入由酵母rDNA序列引導同源整閤的酵母YIp型錶達載體pWHY中,構成雙基因錶達分泌質粒pWAG.採用pWAG與酵母YEp型G418抗性錶達質粒的共轉化,將兩箇基因錶達元件整閤到酒精生產酵母菌株AS2.346的染色體rDNA序列中,穫得同時錶達胞外痠性α-澱粉酶和糖化酶的雙功能酒精酵母工程菌.
용PCR합성적흑곡매(Aspergillus niger)산성α-정분매(Acid α-amylase)적cDNA,구건료유효모순탈경매(ADH1)계동자화종지자인도표체,산성α-정분매자신신호태서렬인도분비적표체원건,여흑곡매당화매cDNA적표체원건동시삽입유효모rDNA서렬인도동원정합적효모YIp형표체재체pWHY중,구성쌍기인표체분비질립pWAG.채용pWAG여효모YEp형G418항성표체질립적공전화,장량개기인표체원건정합도주정생산효모균주AS2.346적염색체rDNA서렬중,획득동시표체포외산성α-정분매화당화매적쌍공능주정효모공정균.
