第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
4期
416-418
,共3页
杨芳%何援利%姜孝玉%刘芸%彭冬先%宗利丽
楊芳%何援利%薑孝玉%劉蕓%彭鼕先%宗利麗
양방%하원리%강효옥%류예%팽동선%종리려
人内皮抑素%基因克隆%表达%纯化%抗血管生成作用
人內皮抑素%基因剋隆%錶達%純化%抗血管生成作用
인내피억소%기인극륭%표체%순화%항혈관생성작용
目的获得有生物学活性的人内皮抑素蛋白.方法用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)得到人内皮抑素编码区基因,连接PGEM-T载体,测序确认,定向克隆入pBV220表达载体,转化大肠杆菌DH5α进行表达、纯化及活性测定.结果经测序分析证实,所获得的552bp基因片段序列属于人内皮抑素基因,构建表达载体在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,并具有生物学活性.结论人内皮抑素基因在大肠杆菌中获得非融合表达,表达蛋白能够抑制人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)的增殖,为应用内皮抑素进行抗血管生成治疗奠定了基础.
目的穫得有生物學活性的人內皮抑素蛋白.方法用反轉錄多聚酶鏈反應(RT-PCR)得到人內皮抑素編碼區基因,連接PGEM-T載體,測序確認,定嚮剋隆入pBV220錶達載體,轉化大腸桿菌DH5α進行錶達、純化及活性測定.結果經測序分析證實,所穫得的552bp基因片段序列屬于人內皮抑素基因,構建錶達載體在大腸桿菌中錶達,經SDS-PAGE分析,齣現特異性蛋白質條帶,併具有生物學活性.結論人內皮抑素基因在大腸桿菌中穫得非融閤錶達,錶達蛋白能夠抑製人臍靜脈血管內皮細胞(ECV304)的增殖,為應用內皮抑素進行抗血管生成治療奠定瞭基礎.
목적획득유생물학활성적인내피억소단백.방법용반전록다취매련반응(RT-PCR)득도인내피억소편마구기인,련접PGEM-T재체,측서학인,정향극륭입pBV220표체재체,전화대장간균DH5α진행표체、순화급활성측정.결과경측서분석증실,소획득적552bp기인편단서렬속우인내피억소기인,구건표체재체재대장간균중표체,경SDS-PAGE분석,출현특이성단백질조대,병구유생물학활성.결론인내피억소기인재대장간균중획득비융합표체,표체단백능구억제인제정맥혈관내피세포(ECV304)적증식,위응용내피억소진행항혈관생성치료전정료기출.
