畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2005年
11期
7-10
,共4页
夏向荣%柏庆荣%柏坤桃%黄灿平%姜平
夏嚮榮%柏慶榮%柏坤桃%黃燦平%薑平
하향영%백경영%백곤도%황찬평%강평
PRRSV%抗体%诊断%竞争ELISA
PRRSV%抗體%診斷%競爭ELISA
PRRSV%항체%진단%경쟁ELISA
以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)基因的原核表达产物重组N蛋白为包被抗原,利用兔抗重组N蛋白血清和PRRS猪血清竞争该抗原,建立间接竞争ELISA方法检测PRRS抗体.经研究确定重组N蛋白的包被浓度为0.3 μg/mL,检测血清不用稀释,兔抗重组N蛋白血清的工作浓度为1:3 000,酶标抗体的工作浓度为1: 10 000,包被液为0.05 mol/L、pH 9.6的碳酸盐缓冲液.该方法特异性强,稳定性和重复性好,整个检测过程可在3 h内完成.以IDEXX试剂盒的检测结果为参照标准,该方法的敏感性为79.76%,特异性为90.9%,符合率为83.59%.将该方法按试剂盒要求标准化,4 ℃放置5个月,检测效果不变.
以豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)覈衣殼蛋白(N蛋白)基因的原覈錶達產物重組N蛋白為包被抗原,利用兔抗重組N蛋白血清和PRRS豬血清競爭該抗原,建立間接競爭ELISA方法檢測PRRS抗體.經研究確定重組N蛋白的包被濃度為0.3 μg/mL,檢測血清不用稀釋,兔抗重組N蛋白血清的工作濃度為1:3 000,酶標抗體的工作濃度為1: 10 000,包被液為0.05 mol/L、pH 9.6的碳痠鹽緩遲液.該方法特異性彊,穩定性和重複性好,整箇檢測過程可在3 h內完成.以IDEXX試劑盒的檢測結果為參照標準,該方法的敏感性為79.76%,特異性為90.9%,符閤率為83.59%.將該方法按試劑盒要求標準化,4 ℃放置5箇月,檢測效果不變.
이저번식여호흡종합정병독(PRRSV)핵의각단백(N단백)기인적원핵표체산물중조N단백위포피항원,이용토항중조N단백혈청화PRRS저혈청경쟁해항원,건립간접경쟁ELISA방법검측PRRS항체.경연구학정중조N단백적포피농도위0.3 μg/mL,검측혈청불용희석,토항중조N단백혈청적공작농도위1:3 000,매표항체적공작농도위1: 10 000,포피액위0.05 mol/L、pH 9.6적탄산염완충액.해방법특이성강,은정성화중복성호,정개검측과정가재3 h내완성.이IDEXX시제합적검측결과위삼조표준,해방법적민감성위79.76%,특이성위90.9%,부합솔위83.59%.장해방법안시제합요구표준화,4 ℃방치5개월,검측효과불변.
