中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2007年
3期
213-216
,共4页
郭传坤%黎学铭%李锦辉%毛玮%林珍%杜进发%黄天谊
郭傳坤%黎學銘%李錦輝%毛瑋%林珍%杜進髮%黃天誼
곽전곤%려학명%리금휘%모위%림진%두진발%황천의
恶性疟原虫%间日疟原虫%套式/多重PCR%标签引物%疟疾诊断
噁性瘧原蟲%間日瘧原蟲%套式/多重PCR%標籤引物%瘧疾診斷
악성학원충%간일학원충%투식/다중PCR%표첨인물%학질진단
目的 提高标签引物-套式/多重PCR诊断疟疾的敏感性、特异性与稳定性.方法 用滤纸法采集非疟疾发热病人血样30份及其他传染病(感冒,流感,伤寒,肝炎等)患者血样20份;抽取恶性疟和间日疟各1例患者血4ml,进行系列稀释制备不同疟原虫含量的感染血样;健康者血样作对照.用热裂解法制备DNA模板,用线粒体细胞色素氧化酶基因作为靶基因,应用相关软件和网络资源(Primer Premier 5.0,PUBMED,NCBI-BLAST和Mfold服务器)设计和优化标签引物-套式/多重PCR,并用于检测所采集制备的各种血样.结果 间日疟与恶性疟患者血系列稀释为含1 000、100、10和1个虫/μl后经标签引物-套式/多重PCR检测,恶性疟和间日疟患者各稀释含虫血样分别在611 bp和255 bp出现1条带,能检测到原虫密度均为1个虫/μl血;非疟疾发热病人血样30份及其他传染病患者血样均为阴性;健康者血样未出现扩增条带,每种血样反复测试3次以上均获得同样结果.结论 经优化的标签引物-套式/多重PCR在疟疾诊断中具有较高的敏感性、特异性和稳定性.
目的 提高標籤引物-套式/多重PCR診斷瘧疾的敏感性、特異性與穩定性.方法 用濾紙法採集非瘧疾髮熱病人血樣30份及其他傳染病(感冒,流感,傷寒,肝炎等)患者血樣20份;抽取噁性瘧和間日瘧各1例患者血4ml,進行繫列稀釋製備不同瘧原蟲含量的感染血樣;健康者血樣作對照.用熱裂解法製備DNA模闆,用線粒體細胞色素氧化酶基因作為靶基因,應用相關軟件和網絡資源(Primer Premier 5.0,PUBMED,NCBI-BLAST和Mfold服務器)設計和優化標籤引物-套式/多重PCR,併用于檢測所採集製備的各種血樣.結果 間日瘧與噁性瘧患者血繫列稀釋為含1 000、100、10和1箇蟲/μl後經標籤引物-套式/多重PCR檢測,噁性瘧和間日瘧患者各稀釋含蟲血樣分彆在611 bp和255 bp齣現1條帶,能檢測到原蟲密度均為1箇蟲/μl血;非瘧疾髮熱病人血樣30份及其他傳染病患者血樣均為陰性;健康者血樣未齣現擴增條帶,每種血樣反複測試3次以上均穫得同樣結果.結論 經優化的標籤引物-套式/多重PCR在瘧疾診斷中具有較高的敏感性、特異性和穩定性.
목적 제고표첨인물-투식/다중PCR진단학질적민감성、특이성여은정성.방법 용려지법채집비학질발열병인혈양30빈급기타전염병(감모,류감,상한,간염등)환자혈양20빈;추취악성학화간일학각1례환자혈4ml,진행계렬희석제비불동학원충함량적감염혈양;건강자혈양작대조.용열렬해법제비DNA모판,용선립체세포색소양화매기인작위파기인,응용상관연건화망락자원(Primer Premier 5.0,PUBMED,NCBI-BLAST화Mfold복무기)설계화우화표첨인물-투식/다중PCR,병용우검측소채집제비적각충혈양.결과 간일학여악성학환자혈계렬희석위함1 000、100、10화1개충/μl후경표첨인물-투식/다중PCR검측,악성학화간일학환자각희석함충혈양분별재611 bp화255 bp출현1조대,능검측도원충밀도균위1개충/μl혈;비학질발열병인혈양30빈급기타전염병환자혈양균위음성;건강자혈양미출현확증조대,매충혈양반복측시3차이상균획득동양결과.결론 경우화적표첨인물-투식/다중PCR재학질진단중구유교고적민감성、특이성화은정성.
