中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2008年
3期
252-256
,共5页
魏丽丽%崔涛%丁嵩涛%易发平%刘革力%马永平%宋方洲
魏麗麗%崔濤%丁嵩濤%易髮平%劉革力%馬永平%宋方洲
위려려%최도%정숭도%역발평%류혁력%마영평%송방주
人IL-24基因%腺病毒载体%活性检测
人IL-24基因%腺病毒載體%活性檢測
인IL-24기인%선병독재체%활성검측
目的:克隆人白介素24基因,构建其腺病毒载体,获取病毒重组子,并研究其生物学活性.方法:用密执毒素(Mezerein)诱导HeLa细胞表达IL-24,通过RT-PCR获取IL-24 cDNA,将其亚克隆至pAdTrack-CMV载体,经PmeⅠ线性化后,与腺病毒的骨架载体pAdEasy-1在BJ5183菌中同源重组,HEK293细胞包装扩增,PCR、Western blot鉴定.AdIL-24处理宫颈癌CaSki细胞,通过MTT细胞存活实验检测其活性;Hoechst33342染色、流式细胞仪检测凋亡;Western blot检测Bax、Bcl-2、p53蛋白的表达.结果:获取人IL-24的cDNA,序列与GeneBank公布序列完全一致,成功构建腺病毒载体,AdIL-24对CaSki细胞具有抑制生长、促进凋亡的作用,并上调Bax、p53蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达.结论:成功构建人IL-24的重组腺病毒载体,其病毒重组子具有生物活性.
目的:剋隆人白介素24基因,構建其腺病毒載體,穫取病毒重組子,併研究其生物學活性.方法:用密執毒素(Mezerein)誘導HeLa細胞錶達IL-24,通過RT-PCR穫取IL-24 cDNA,將其亞剋隆至pAdTrack-CMV載體,經PmeⅠ線性化後,與腺病毒的骨架載體pAdEasy-1在BJ5183菌中同源重組,HEK293細胞包裝擴增,PCR、Western blot鑒定.AdIL-24處理宮頸癌CaSki細胞,通過MTT細胞存活實驗檢測其活性;Hoechst33342染色、流式細胞儀檢測凋亡;Western blot檢測Bax、Bcl-2、p53蛋白的錶達.結果:穫取人IL-24的cDNA,序列與GeneBank公佈序列完全一緻,成功構建腺病毒載體,AdIL-24對CaSki細胞具有抑製生長、促進凋亡的作用,併上調Bax、p53蛋白錶達,下調Bcl-2蛋白錶達.結論:成功構建人IL-24的重組腺病毒載體,其病毒重組子具有生物活性.
목적:극륭인백개소24기인,구건기선병독재체,획취병독중조자,병연구기생물학활성.방법:용밀집독소(Mezerein)유도HeLa세포표체IL-24,통과RT-PCR획취IL-24 cDNA,장기아극륭지pAdTrack-CMV재체,경PmeⅠ선성화후,여선병독적골가재체pAdEasy-1재BJ5183균중동원중조,HEK293세포포장확증,PCR、Western blot감정.AdIL-24처리궁경암CaSki세포,통과MTT세포존활실험검측기활성;Hoechst33342염색、류식세포의검측조망;Western blot검측Bax、Bcl-2、p53단백적표체.결과:획취인IL-24적cDNA,서렬여GeneBank공포서렬완전일치,성공구건선병독재체,AdIL-24대CaSki세포구유억제생장、촉진조망적작용,병상조Bax、p53단백표체,하조Bcl-2단백표체.결론:성공구건인IL-24적중조선병독재체,기병독중조자구유생물활성.
