中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2008年
4期
304-306
,共3页
杨秋林%张如胜%伍和平%张愉快%王可耕
楊鞦林%張如勝%伍和平%張愉快%王可耕
양추림%장여성%오화평%장유쾌%왕가경
弓形虫%检测%环介导等温扩增技术
弓形蟲%檢測%環介導等溫擴增技術
궁형충%검측%배개도등온확증기술
目的 用环介导等温扩增(LAMP)技术检测弓形虫.方法 用酚-氯仿法提取弓形虫速殖子基因组DNA,设计两对扩增弓形虫B1基因的LAMP引物.以间日疟原虫、恶性疟原虫、卡氏肺孢子虫、日本血吸虫及小鼠白细胞作对照.进行LAMP反应,产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果 ,绿色判为阳性,棕色判为阴性.将弓形虫速殖子经倍比稀释为(2～3)×106个/ml至(2～3)×10-1个/ml等8个浓度,进行LAMP反应,验证该方法 的敏感性.结果 LAMP反应结果显示,弓形虫速殖子检测管经显色后呈绿色,对照组均呈棕色.弓形虫的LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,对照组均无扩增产物.LAMP技术可检测到的弓形虫速殖子最低浓度为2～3个/ml.结论 LAMP技术在弓形虫检测中显示出较好的特异性与敏感性.
目的 用環介導等溫擴增(LAMP)技術檢測弓形蟲.方法 用酚-氯倣法提取弓形蟲速殖子基因組DNA,設計兩對擴增弓形蟲B1基因的LAMP引物.以間日瘧原蟲、噁性瘧原蟲、卡氏肺孢子蟲、日本血吸蟲及小鼠白細胞作對照.進行LAMP反應,產物經SYBR Green I顯色及電泳後觀察結果 ,綠色判為暘性,棕色判為陰性.將弓形蟲速殖子經倍比稀釋為(2～3)×106箇/ml至(2～3)×10-1箇/ml等8箇濃度,進行LAMP反應,驗證該方法 的敏感性.結果 LAMP反應結果顯示,弓形蟲速殖子檢測管經顯色後呈綠色,對照組均呈棕色.弓形蟲的LAMP產物經電泳後呈LAMP特徵性梯狀條帶,對照組均無擴增產物.LAMP技術可檢測到的弓形蟲速殖子最低濃度為2～3箇/ml.結論 LAMP技術在弓形蟲檢測中顯示齣較好的特異性與敏感性.
목적 용배개도등온확증(LAMP)기술검측궁형충.방법 용분-록방법제취궁형충속식자기인조DNA,설계량대확증궁형충B1기인적LAMP인물.이간일학원충、악성학원충、잡씨폐포자충、일본혈흡충급소서백세포작대조.진행LAMP반응,산물경SYBR Green I현색급전영후관찰결과 ,록색판위양성,종색판위음성.장궁형충속식자경배비희석위(2～3)×106개/ml지(2～3)×10-1개/ml등8개농도,진행LAMP반응,험증해방법 적민감성.결과 LAMP반응결과현시,궁형충속식자검측관경현색후정록색,대조조균정종색.궁형충적LAMP산물경전영후정LAMP특정성제상조대,대조조균무확증산물.LAMP기술가검측도적궁형충속식자최저농도위2～3개/ml.결론 LAMP기술재궁형충검측중현시출교호적특이성여민감성.
