农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2008年
5期
881-885
,共5页
锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)%毕赤酵母%基因改造%表达
錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)%畢赤酵母%基因改造%錶達
맹초양화물기화매(Mn-SOD)%필적효모%기인개조%표체
根据毕赤酵母(Pichia pastons)密码子的偏好性,以氨基酸序列不变为原则,对源于蜡样芽胞杆菌(Bacillus cernes)M22的Mn-SOD基因进行分子改造,设计、合成了新的基因序列Mn-SOD-2.构建酵母表达载体pPICZαA/Mn-SOD-2,并整合至毕赤酵母GS115染色体.结果表明,所构建的重组体经0.5%甲醇诱导表达后,Native-PAGE检测证实有清晰单一活性条带;SDS-PAGE检测证实重组蛋白的分子量24 kD.酶活分析表明,外源蛋白的活性较改造前增加了2.2倍,且表达稳定性良好.
根據畢赤酵母(Pichia pastons)密碼子的偏好性,以氨基痠序列不變為原則,對源于蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cernes)M22的Mn-SOD基因進行分子改造,設計、閤成瞭新的基因序列Mn-SOD-2.構建酵母錶達載體pPICZαA/Mn-SOD-2,併整閤至畢赤酵母GS115染色體.結果錶明,所構建的重組體經0.5%甲醇誘導錶達後,Native-PAGE檢測證實有清晰單一活性條帶;SDS-PAGE檢測證實重組蛋白的分子量24 kD.酶活分析錶明,外源蛋白的活性較改造前增加瞭2.2倍,且錶達穩定性良好.
근거필적효모(Pichia pastons)밀마자적편호성,이안기산서렬불변위원칙,대원우사양아포간균(Bacillus cernes)M22적Mn-SOD기인진행분자개조,설계、합성료신적기인서렬Mn-SOD-2.구건효모표체재체pPICZαA/Mn-SOD-2,병정합지필적효모GS115염색체.결과표명,소구건적중조체경0.5%갑순유도표체후,Native-PAGE검측증실유청석단일활성조대;SDS-PAGE검측증실중조단백적분자량24 kD.매활분석표명,외원단백적활성교개조전증가료2.2배,차표체은정성량호.
