青岛科技大学学报(自然科学版)
青島科技大學學報(自然科學版)
청도과기대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF QINGDAO UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2009年
2期
95-100
,共6页
张波%刘鹤%焦奎%付洵%孙伟
張波%劉鶴%焦奎%付洵%孫偉
장파%류학%초규%부순%손위
DNA检测%极谱络合吸附波%硒化铅纳米粒子%DNA杂交%PAT基因
DNA檢測%極譜絡閤吸附波%硒化鉛納米粒子%DNA雜交%PAT基因
DNA검측%겁보락합흡부파%서화연납미입자%DNA잡교%PAT기인
应用极谱络合吸附波方法检测了草丁膦乙酰转移酶基因(PAT基因)的DNA特定序列.用水热法合成表面具有自由羧基的硒化铅(PbSe)纳米粒子,以乙基-(3-二甲基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)为偶联活化剂,将其标记于合成的5′端氨基修饰的寡聚核苷酸片段上,制成DNA探针,用于检测互补的目标DNA序列.以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)阳离子表面活性剂修饰的碳糊电极作为基底电极,通过静电作用将来自于PAT基因的目标DNA特定序列固定在电极表面,并与标记有PbSe纳米粒子的互补DNA探针杂交.以铅-铜铁试剂-六次甲基四胺-HAc极谱络合吸附波测定氧化溶解PbSe得到的Pb2+,成功检测了PAT基因的DNA特定序列.测定目标DNA的线性范围为1.0×10-11 至1.0×10-7 mol·L-1,检测限为8.7×10-12 mol·L-1 (3σ).此方法测定目标DNA序列检测限低,灵敏度高,线性范围宽,重现性好,操作简捷方便,对互补和非互补序列具有很好的识别能力.
應用極譜絡閤吸附波方法檢測瞭草丁膦乙酰轉移酶基因(PAT基因)的DNA特定序列.用水熱法閤成錶麵具有自由羧基的硒化鉛(PbSe)納米粒子,以乙基-(3-二甲基丙基)碳二亞胺鹽痠鹽(EDC)為偶聯活化劑,將其標記于閤成的5′耑氨基脩飾的寡聚覈苷痠片段上,製成DNA探針,用于檢測互補的目標DNA序列.以十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)暘離子錶麵活性劑脩飾的碳糊電極作為基底電極,通過靜電作用將來自于PAT基因的目標DNA特定序列固定在電極錶麵,併與標記有PbSe納米粒子的互補DNA探針雜交.以鉛-銅鐵試劑-六次甲基四胺-HAc極譜絡閤吸附波測定氧化溶解PbSe得到的Pb2+,成功檢測瞭PAT基因的DNA特定序列.測定目標DNA的線性範圍為1.0×10-11 至1.0×10-7 mol·L-1,檢測限為8.7×10-12 mol·L-1 (3σ).此方法測定目標DNA序列檢測限低,靈敏度高,線性範圍寬,重現性好,操作簡捷方便,對互補和非互補序列具有很好的識彆能力.
응용겁보락합흡부파방법검측료초정련을선전이매기인(PAT기인)적DNA특정서렬.용수열법합성표면구유자유최기적서화연(PbSe)납미입자,이을기-(3-이갑기병기)탄이아알염산염(EDC)위우련활화제,장기표기우합성적5′단안기수식적과취핵감산편단상,제성DNA탐침,용우검측호보적목표DNA서렬.이십륙완기삼갑기추화안(CTAB)양리자표면활성제수식적탄호전겁작위기저전겁,통과정전작용장래자우PAT기인적목표DNA특정서렬고정재전겁표면,병여표기유PbSe납미입자적호보DNA탐침잡교.이연-동철시제-륙차갑기사알-HAc겁보락합흡부파측정양화용해PbSe득도적Pb2+,성공검측료PAT기인적DNA특정서렬.측정목표DNA적선성범위위1.0×10-11 지1.0×10-7 mol·L-1,검측한위8.7×10-12 mol·L-1 (3σ).차방법측정목표DNA서렬검측한저,령민도고,선성범위관,중현성호,조작간첩방편,대호보화비호보서렬구유흔호적식별능력.