CAJ | 학술논문

单链构象多态性(SSCP) 技术是一种简便、灵敏的多态性检测方法,近年在植物研究中得到了较多应用.为了检测花生品种间抗病基因同源序列(RGA)的单核苷酸差异,对影响花生RGA-SSCP的电泳温度、电压、胶浓度、交联度、变性剂等因素进行了优化.结果表明,碱变性后的PCR产物(PCR产物与碱变性剂比例1∶2)在不加甘油的8%非变性聚丙烯酰胺凝胶(交联度为29∶1)、1×TBE电泳缓冲液、恒温4℃和600 V条件下电泳5 h为最佳优化组合.用上述优化方法分析了抗、感北方根结线虫病的亲本及F2群体部分单株,获得了电泳条带细而清晰的SSCP图.该体系的建立对RGA-SSCP标记用于花生基因定位、遗传图谱构建、标记辅助选择等具有重要意义.
단련구상다태성(SSCP) 기술시일충간편、령민적다태성검측방법,근년재식물연구중득도료교다응용.위료검측화생품충간항병기인동원서렬(RGA)적단핵감산차이,대영향화생RGA-SSCP적전영온도、전압、효농도、교련도、변성제등인소진행료우화.결과표명,감변성후적PCR산물(PCR산물여감변성제비례1∶2)재불가감유적8%비변성취병희선알응효(교련도위29∶1)、1×TBE전영완충액、항온4℃화600 V조건하전영5 h위최가우화조합.용상술우화방법분석료항、감북방근결선충병적친본급F2군체부분단주,획득료전영조대세이청석적SSCP도.해체계적건립대RGA-SSCP표기용우화생기인정위、유전도보구건、표기보조선택등구유중요의의.