中国海洋大学学报（自然科学版）
中國海洋大學學報（自然科學版）
중국해양대학학보（자연과학판）
PERIODICAL OF OCEAN UNIVERSITY OF CHINA
2010年
12期
64-70
,共7页
樊廷俊%孙爱%杨秀霞%姜国建%徐晓辉%郭雪阳
樊廷俊%孫愛%楊秀霞%薑國建%徐曉輝%郭雪暘
번정준%손애%양수하%강국건%서효휘%곽설양
大黄鱼%鳍细胞%细胞系%久效磷%毒性作用
大黃魚%鰭細胞%細胞繫%久效燐%毒性作用
대황어%기세포%세포계%구효린%독성작용
为了建市大黄鱼(Pseudosciaena crocea)鳍细胞系,为其细胞毒理学、病毒学与细胞工程等研究奠定基础,本文采用酶消化法使用含有20%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12、Leibovitz L-15和DMEM培养液(pH7.2)在22～28℃分别启动了大黄鱼鳍组织的体外培养,通过添加促细胞贴壁和分裂的物质在最适堵养条件下对大黄鱼鳍细胞进行了原代培养和继代培养,并研究了久效磷对大黄鱼细胞系鳍细胞的毒性作用.体外培养结果显示,大黄鱼鳍细胞的最适培养液为20%FBS-DMEM/F12,最适培养温度为25℃,体外培养鳍细胞的形态主要为成纤维细胞样,22 d后便可形成汇合细胞单层,经过连续继代培养成功建立了大黄鱼的连续性鳍细胞系,目前已传至第112代;对第60代大黄鱼鳍细胞系细胞的鉴定结果显示,其群体倍增时间为50.96 h,分裂状态十分旺盛,虽然出现了染色体的非整倍性,但其特征性染色体数目仍为48条,并具有正常的6m+6sm+36t二倍体核型,证明所建立的细胞系确为大黄鱼鳍细胞系.不同浓度久效磷处理的检测结果显示,大黄鱼鳍细胞对久效磷敏感,20～160 μg/mL久效磷可引起鳍细胞乙酰胆碱酯酶活性的持续性显著降低,引起超氧化物歧化酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性的显著升高并随着浓度的升高而逐渐降低,久效磷对该细胞系细胞的48 h半抑制浓度(IC50)为43.05 μg/mL,,证实久效磷对大黄鱼鳍细胞具有显著的毒性作用.
為瞭建市大黃魚(Pseudosciaena crocea)鰭細胞繫,為其細胞毒理學、病毒學與細胞工程等研究奠定基礎,本文採用酶消化法使用含有20%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12、Leibovitz L-15和DMEM培養液(pH7.2)在22～28℃分彆啟動瞭大黃魚鰭組織的體外培養,通過添加促細胞貼壁和分裂的物質在最適堵養條件下對大黃魚鰭細胞進行瞭原代培養和繼代培養,併研究瞭久效燐對大黃魚細胞繫鰭細胞的毒性作用.體外培養結果顯示,大黃魚鰭細胞的最適培養液為20%FBS-DMEM/F12,最適培養溫度為25℃,體外培養鰭細胞的形態主要為成纖維細胞樣,22 d後便可形成彙閤細胞單層,經過連續繼代培養成功建立瞭大黃魚的連續性鰭細胞繫,目前已傳至第112代;對第60代大黃魚鰭細胞繫細胞的鑒定結果顯示,其群體倍增時間為50.96 h,分裂狀態十分旺盛,雖然齣現瞭染色體的非整倍性,但其特徵性染色體數目仍為48條,併具有正常的6m+6sm+36t二倍體覈型,證明所建立的細胞繫確為大黃魚鰭細胞繫.不同濃度久效燐處理的檢測結果顯示,大黃魚鰭細胞對久效燐敏感,20～160 μg/mL久效燐可引起鰭細胞乙酰膽堿酯酶活性的持續性顯著降低,引起超氧化物歧化酶和穀胱甘肽-S-轉移酶活性的顯著升高併隨著濃度的升高而逐漸降低,久效燐對該細胞繫細胞的48 h半抑製濃度(IC50)為43.05 μg/mL,,證實久效燐對大黃魚鰭細胞具有顯著的毒性作用.
위료건시대황어(Pseudosciaena crocea)기세포계,위기세포독이학、병독학여세포공정등연구전정기출,본문채용매소화법사용함유20%태우혈청(FBS)적DMEM/F12、Leibovitz L-15화DMEM배양액(pH7.2)재22～28℃분별계동료대황어기조직적체외배양,통과첨가촉세포첩벽화분렬적물질재최괄도양조건하대대황어기세포진행료원대배양화계대배양,병연구료구효린대대황어세포계기세포적독성작용.체외배양결과현시,대황어기세포적최괄배양액위20%FBS-DMEM/F12,최괄배양온도위25℃,체외배양기세포적형태주요위성섬유세포양,22 d후편가형성회합세포단층,경과련속계대배양성공건립료대황어적련속성기세포계,목전이전지제112대;대제60대대황어기세포계세포적감정결과현시,기군체배증시간위50.96 h,분렬상태십분왕성,수연출현료염색체적비정배성,단기특정성염색체수목잉위48조,병구유정상적6m+6sm+36t이배체핵형,증명소건립적세포계학위대황어기세포계.불동농도구효린처리적검측결과현시,대황어기세포대구효린민감,20～160 μg/mL구효린가인기기세포을선담감지매활성적지속성현저강저,인기초양화물기화매화곡광감태-S-전이매활성적현저승고병수착농도적승고이축점강저,구효린대해세포계세포적48 h반억제농도(IC50)위43.05 μg/mL,,증실구효린대대황어기세포구유현저적독성작용.
