CAJ | 학술논문

目的探讨基因修饰(gene modification,GM)胎肝细胞(fetal liver cells,FLC)脾内移植途径介导细胞因子基因治疗的可行性和有效性,为肿瘤放疗病人免疫和造血功能的恢复提供一种治疗手段和途径.方法将经LacZ或粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因体外修饰的小鼠FLC脾内注射后,观察其生物学行为.结果①病毒/细胞感染比率(MOI)为50,转染时间为2 h时,能获得80%～85%的转染效率;②通过FACS分析,基因转移体系对FLC群体的细胞周期、凋亡细胞比例以及CD34+细胞含量无明显影响;③照射小鼠尾静脉注射FLC-GM后,其8 d脾克隆形成单位(CFU-S8)数目明显升高,提示GM-CSF基因转染有助于促进FLC中较晚期定向干细胞的增殖、分化以及体内植入;④[1]1In标记的FLC脾内移植后2 h即有20%～25%细胞转位于肝脏,48 h肝内移入量最高,达50%～55%,并持续至检测第5天,只有22%左右的肝细胞滞留于脾脏;⑤血清分泌水平在脾内移植后48 h最高,达(356±58)pg/ml,此时行脾切除,GM-CSF仍具有一定量的表达水平;⑥同种异体FLC-GM脾内移植引起的宿主迟发型变态反应(DTH)强度明显弱于同种异体脾细胞皮下致敏组(对照组).结论基因修饰的FLC能够保持其原有的生物学性质,脾内注射后能转位于肝脏,同化人宿主肝内长期存活,并发挥正常功能.
목적탐토기인수식(gene modification,GM)태간세포(fetal liver cells,FLC)비내이식도경개도세포인자기인치료적가행성화유효성,위종류방료병인면역화조혈공능적회복제공일충치료수단화도경.방법장경LacZ혹립/거서세포집락자격인자(GM-CSF)기인체외수식적소서FLC비내주사후,관찰기생물학행위.결과①병독/세포감염비솔(MOI)위50,전염시간위2 h시,능획득80%～85%적전염효솔;②통과FACS분석,기인전이체계대FLC군체적세포주기、조망세포비례이급CD34+세포함량무명현영향;③조사소서미정맥주사FLC-GM후,기8 d비극륭형성단위(CFU-S8)수목명현승고,제시GM-CSF기인전염유조우촉진FLC중교만기정향간세포적증식、분화이급체내식입;④[1]1In표기적FLC비내이식후2 h즉유20%～25%세포전위우간장,48 h간내이입량최고,체50%～55%,병지속지검측제5천,지유22%좌우적간세포체류우비장;⑤혈청분비수평재비내이식후48 h최고,체(356±58)pg/ml,차시행비절제,GM-CSF잉구유일정량적표체수평;⑥동충이체FLC-GM비내이식인기적숙주지발형변태반응(DTH)강도명현약우동충이체비세포피하치민조(대조조).결론기인수식적FLC능구보지기원유적생물학성질,비내주사후능전위우간장,동화인숙주간내장기존활,병발휘정상공능.