科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2005年
18期
1978-1983
,共6页
糖蛋白G%原核表达%定位%功能
糖蛋白G%原覈錶達%定位%功能
당단백G%원핵표체%정위%공능
克隆测定了传染性喉气管炎病毒(ILTV)北京E3和Zhonghai毒株的糖蛋白G基因(gG)序列, 并与多种动物的Ⅰ型--疱疹病毒gG基因序列作了比对.通过克隆gG基因至原核表达载体pET30a(+)构建pET30a-gG质粒, IPTG诱导表达含pET30a-gG重组质粒的阳性宿主菌后, 分离纯化得到分子量约35 kD的His-GG融合蛋白.利用该融合蛋白制备的纯化的抗His-GG大鼠多抗血清, 观测ILTV糖蛋白G的在细胞上的分布, 发现糖蛋白G主要存在于宿主细胞的细胞核外周及细胞膜上, 在散在细胞内的分布较为分散, 而在融合细胞的结合部位分布较为集中.利用抗体中和病毒糖蛋白G的实验结果表明, 糖蛋白G可能参与病毒从细胞到细胞的直接感染(CTCS), 从而影响病毒复制和噬斑的形成.
剋隆測定瞭傳染性喉氣管炎病毒(ILTV)北京E3和Zhonghai毒株的糖蛋白G基因(gG)序列, 併與多種動物的Ⅰ型--皰疹病毒gG基因序列作瞭比對.通過剋隆gG基因至原覈錶達載體pET30a(+)構建pET30a-gG質粒, IPTG誘導錶達含pET30a-gG重組質粒的暘性宿主菌後, 分離純化得到分子量約35 kD的His-GG融閤蛋白.利用該融閤蛋白製備的純化的抗His-GG大鼠多抗血清, 觀測ILTV糖蛋白G的在細胞上的分佈, 髮現糖蛋白G主要存在于宿主細胞的細胞覈外週及細胞膜上, 在散在細胞內的分佈較為分散, 而在融閤細胞的結閤部位分佈較為集中.利用抗體中和病毒糖蛋白G的實驗結果錶明, 糖蛋白G可能參與病毒從細胞到細胞的直接感染(CTCS), 從而影響病毒複製和噬斑的形成.
극륭측정료전염성후기관염병독(ILTV)북경E3화Zhonghai독주적당단백G기인(gG)서렬, 병여다충동물적Ⅰ형--포진병독gG기인서렬작료비대.통과극륭gG기인지원핵표체재체pET30a(+)구건pET30a-gG질립, IPTG유도표체함pET30a-gG중조질립적양성숙주균후, 분리순화득도분자량약35 kD적His-GG융합단백.이용해융합단백제비적순화적항His-GG대서다항혈청, 관측ILTV당단백G적재세포상적분포, 발현당단백G주요존재우숙주세포적세포핵외주급세포막상, 재산재세포내적분포교위분산, 이재융합세포적결합부위분포교위집중.이용항체중화병독당단백G적실험결과표명, 당단백G가능삼여병독종세포도세포적직접감염(CTCS), 종이영향병독복제화서반적형성.
