HCV全长cDNA细胞培养适应性突变体的构建及其体外转录制备感染性RNA的研究
HCV전장cDNA세포배양괄응성돌변체적구건급기체외전록제비감염성RNA적연구
Construction of Full-length HCV cDNA with Cell Culture-adaptive Mutations and Preparation of Infectious RNA by Transcription in vitro
  • 万方数据
    科学技术与工程 과학기술여공정
    SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
    2006年 16期 2428-2432 ,共5页

    孙梦宁%薛小平%尹文%吕欣%雷迎峰%韦三华%胡兴斌%杨敬

    손몽저%설소평%윤문%려흔%뢰영봉%위삼화%호흥빈%양경

    丙型肝炎病毒%突变体%感染性RNA%细胞培养 丙型肝炎病毒%突變體%感染性RNA%細胞培養
    병형간염병독%돌변체%감염성RNA%세포배양
    运用重叠延伸PCR方法对HCV全长基因组cDNA NS3和NS5A上的E1202G、T1280I和S2197P进行细胞培养适应性突变,构建含有细胞培养适应性突变的HCV全长基因组cDNA,体外转录制备RNA,脂质体法转染人肝癌细胞Huh-7,以RT-PCR检测HCV正、负链RNA,间接免疫荧光法和Western blot检测细胞内HCV NS3蛋白的表达.结果证明,转染后细胞内可间断检测到HCV正、负链RNA及HCV NS3蛋白的表达,且突变体RNA与未突变的HCV RNA相比,明显具有更高的复制效率和蛋白表达.该研究为后续HCV体外培养体系的研究提供了可在细胞内高效自主复制的HCV病毒模板.
    운용중첩연신PCR방법대HCV전장기인조cDNA NS3화NS5A상적E1202G、T1280I화S2197P진행세포배양괄응성돌변,구건함유세포배양괄응성돌변적HCV전장기인조cDNA,체외전록제비RNA,지질체법전염인간암세포Huh-7,이RT-PCR검측HCV정、부련RNA,간접면역형광법화Western blot검측세포내HCV NS3단백적표체.결과증명,전염후세포내가간단검측도HCV정、부련RNA급HCV NS3단백적표체,차돌변체RNA여미돌변적HCV RNA상비,명현구유경고적복제효솔화단백표체.해연구위후속HCV체외배양체계적연구제공료가재세포내고효자주복제적HCV병독모판.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문