南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
3期
60-64
,共5页
杨瑾%李晓丹%曹慧%管莉菠%崔中利
楊瑾%李曉丹%曹慧%管莉菠%崔中利
양근%리효단%조혜%관리파%최중리
大肠杆菌%Red同源重组%rRNA 操纵元%16S rRNA基因
大腸桿菌%Red同源重組%rRNA 操縱元%16S rRNA基因
대장간균%Red동원중조%rRNA 조종원%16S rRNA기인
以1株染色体上的5个rRNA操纵元(rrnA、rrnD、rrnE、rrnG和rrnH)被敲除的大肠杆菌(Escherichia coli)菌株SQ88为出发菌,运用λ Red同源重组系统和卡那霉素抗性基因筛选重组子,并利用抗性基因两端的FRT位点通过位点专一性重组将抗性基因去除,最终成功构建了1株仅具有单拷贝rRNA操纵元(rrnB)的E.coli菌株--SQ88C.试验结果发现,此菌株并未出现明显的生长障碍,其生长速率和rRNA/蛋白值与出发菌株SQ88相比有所下降,但并不显著.从而证明了单拷贝rRNA 操纵元在一定条件下能够满足大肠杆菌正常生长的需要,也为在大肠杆菌及其他菌株中快速精确地构建多rRNA 基因缺失菌株提供了有益的参考,并可望在16S rRNA 基因突变研究等方面发挥一定的作用.
以1株染色體上的5箇rRNA操縱元(rrnA、rrnD、rrnE、rrnG和rrnH)被敲除的大腸桿菌(Escherichia coli)菌株SQ88為齣髮菌,運用λ Red同源重組繫統和卡那黴素抗性基因篩選重組子,併利用抗性基因兩耑的FRT位點通過位點專一性重組將抗性基因去除,最終成功構建瞭1株僅具有單拷貝rRNA操縱元(rrnB)的E.coli菌株--SQ88C.試驗結果髮現,此菌株併未齣現明顯的生長障礙,其生長速率和rRNA/蛋白值與齣髮菌株SQ88相比有所下降,但併不顯著.從而證明瞭單拷貝rRNA 操縱元在一定條件下能夠滿足大腸桿菌正常生長的需要,也為在大腸桿菌及其他菌株中快速精確地構建多rRNA 基因缺失菌株提供瞭有益的參攷,併可望在16S rRNA 基因突變研究等方麵髮揮一定的作用.
이1주염색체상적5개rRNA조종원(rrnA、rrnD、rrnE、rrnG화rrnH)피고제적대장간균(Escherichia coli)균주SQ88위출발균,운용λ Red동원중조계통화잡나매소항성기인사선중조자,병이용항성기인량단적FRT위점통과위점전일성중조장항성기인거제,최종성공구건료1주부구유단고패rRNA조종원(rrnB)적E.coli균주--SQ88C.시험결과발현,차균주병미출현명현적생장장애,기생장속솔화rRNA/단백치여출발균주SQ88상비유소하강,단병불현저.종이증명료단고패rRNA 조종원재일정조건하능구만족대장간균정상생장적수요,야위재대장간균급기타균주중쾌속정학지구건다rRNA 기인결실균주제공료유익적삼고,병가망재16S rRNA 기인돌변연구등방면발휘일정적작용.
