中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2008年
10期
879-882,885
,共5页
郗雪艳%曹伟%崔莲仙%何维
郗雪豔%曹偉%崔蓮仙%何維
치설염%조위%최련선%하유
γδT细胞%CDR3取代型γδTCR%抗原识别
γδT細胞%CDR3取代型γδTCR%抗原識彆
γδT세포%CDR3취대형γδTCR%항원식별
目的:建立特异性CDR3区取代型γδTCR转染细胞平台.方法:利用搭桥PCR的方法将已知的γδT细胞克隆DBS4.3特异性CDR3编码序列嵌入到γ9和δ2cDNA序列中,取代原有的CDR3区序列,获得的全长γ9和δ2链分别插入真核表达载体pREP7和pREP9中,共转染J.RT3-T3.5细胞,双压力抗生素筛选获得表达特异性γδTCR的转染细胞,通过ELISA和Realtime PCR检测该转染细胞在接受抗原刺激后IL-2的分泌情况.结果:ELISA和Realtime PCR结果显示表达DBS4.3特异性γδTCR的转染细胞在DBS4.3特异性抗原仲丁胺和抗γδTCR抗体刺激作用下,活化分泌IL-2.结论:构建了特异性CDR3区取代型γδTCR转染细胞平台,为研究γδTCR识别抗原的机制奠定了基础.
目的:建立特異性CDR3區取代型γδTCR轉染細胞平檯.方法:利用搭橋PCR的方法將已知的γδT細胞剋隆DBS4.3特異性CDR3編碼序列嵌入到γ9和δ2cDNA序列中,取代原有的CDR3區序列,穫得的全長γ9和δ2鏈分彆插入真覈錶達載體pREP7和pREP9中,共轉染J.RT3-T3.5細胞,雙壓力抗生素篩選穫得錶達特異性γδTCR的轉染細胞,通過ELISA和Realtime PCR檢測該轉染細胞在接受抗原刺激後IL-2的分泌情況.結果:ELISA和Realtime PCR結果顯示錶達DBS4.3特異性γδTCR的轉染細胞在DBS4.3特異性抗原仲丁胺和抗γδTCR抗體刺激作用下,活化分泌IL-2.結論:構建瞭特異性CDR3區取代型γδTCR轉染細胞平檯,為研究γδTCR識彆抗原的機製奠定瞭基礎.
목적:건립특이성CDR3구취대형γδTCR전염세포평태.방법:이용탑교PCR적방법장이지적γδT세포극륭DBS4.3특이성CDR3편마서렬감입도γ9화δ2cDNA서렬중,취대원유적CDR3구서렬,획득적전장γ9화δ2련분별삽입진핵표체재체pREP7화pREP9중,공전염J.RT3-T3.5세포,쌍압력항생소사선획득표체특이성γδTCR적전염세포,통과ELISA화Realtime PCR검측해전염세포재접수항원자격후IL-2적분비정황.결과:ELISA화Realtime PCR결과현시표체DBS4.3특이성γδTCR적전염세포재DBS4.3특이성항원중정알화항γδTCR항체자격작용하,활화분비IL-2.결론:구건료특이성CDR3구취대형γδTCR전염세포평태,위연구γδTCR식별항원적궤제전정료기출.
