天然产物研究与开发
天然產物研究與開髮
천연산물연구여개발
NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT
2012年
8期
1020-1025
,共6页
马晓瑾%吴婷%罗晶晶%王燕%李阳%刘东亮%孙素荣
馬曉瑾%吳婷%囉晶晶%王燕%李暘%劉東亮%孫素榮
마효근%오정%라정정%왕연%리양%류동량%손소영
骆驼蓬%脂转移蛋白%分离纯化%抗肿瘤%诱导凋亡
駱駝蓬%脂轉移蛋白%分離純化%抗腫瘤%誘導凋亡
락타봉%지전이단백%분리순화%항종류%유도조망
骆驼蓬种子经浸提、硫酸铵沉淀、CM阳离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析分离纯化得到一种具有抗肿瘤细胞增殖活性的蛋白(命名为PhLTP),经Tricine-SDS-PAGE检测为单一蛋白条带,高效液相色谱检测其表观分子量为14.8 kDa左右,表明PhLTP是由两条相同的亚基组成的蛋白.采用Edman降解法对该纯化蛋白的N-末端进行氨基酸测序,其N-末端序列与其他植物非特异性脂转移蛋白相似.对PhLTP抗肿瘤活性进行研究,结果表明其对HeLa、Eca-109、MGC-9和BEL-7404细胞都有增殖抑制活性,其中对HeLa细胞增殖的抑制作用较好,并具有浓度和时间依赖性,其IC50为45 μg/mL.通过Hoechst33258染色观察细胞形态,发现PhLTP能诱导HeLa细胞发生凋亡.
駱駝蓬種子經浸提、硫痠銨沉澱、CM暘離子交換層析和Superdex 75凝膠過濾層析分離純化得到一種具有抗腫瘤細胞增殖活性的蛋白(命名為PhLTP),經Tricine-SDS-PAGE檢測為單一蛋白條帶,高效液相色譜檢測其錶觀分子量為14.8 kDa左右,錶明PhLTP是由兩條相同的亞基組成的蛋白.採用Edman降解法對該純化蛋白的N-末耑進行氨基痠測序,其N-末耑序列與其他植物非特異性脂轉移蛋白相似.對PhLTP抗腫瘤活性進行研究,結果錶明其對HeLa、Eca-109、MGC-9和BEL-7404細胞都有增殖抑製活性,其中對HeLa細胞增殖的抑製作用較好,併具有濃度和時間依賴性,其IC50為45 μg/mL.通過Hoechst33258染色觀察細胞形態,髮現PhLTP能誘導HeLa細胞髮生凋亡.
락타봉충자경침제、류산안침정、CM양리자교환층석화Superdex 75응효과려층석분리순화득도일충구유항종류세포증식활성적단백(명명위PhLTP),경Tricine-SDS-PAGE검측위단일단백조대,고효액상색보검측기표관분자량위14.8 kDa좌우,표명PhLTP시유량조상동적아기조성적단백.채용Edman강해법대해순화단백적N-말단진행안기산측서,기N-말단서렬여기타식물비특이성지전이단백상사.대PhLTP항종류활성진행연구,결과표명기대HeLa、Eca-109、MGC-9화BEL-7404세포도유증식억제활성,기중대HeLa세포증식적억제작용교호,병구유농도화시간의뢰성,기IC50위45 μg/mL.통과Hoechst33258염색관찰세포형태,발현PhLTP능유도HeLa세포발생조망.
