天津医科大学学报
天津醫科大學學報
천진의과대학학보
JOURNAL OF TIANJIN MEDICAL UNIVERSITY
2004年
1期
43-46
,共4页
张颖%郭善一%梁东春%王宝利
張穎%郭善一%樑東春%王寶利
장영%곽선일%량동춘%왕보리
谷氨酸脱羧酶(GAD65)%毕赤酵母%重组
穀氨痠脫羧酶(GAD65)%畢赤酵母%重組
곡안산탈최매(GAD65)%필적효모%중조
目的:构建大鼠谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达重组子,探索一条真核细胞高效表达rGAD的新途径.方法:以pUC18-GAD质粒为模板PCR扩增出大鼠GAD65基因,将其克隆入PGEM-Teasy载体,继而将其克隆到毕赤酵母分泌型质粒表达载体pPIC9K中,重组质粒线性化后PEG法转染入毕赤酵母菌株GS115,PCR筛选转化子.结果:DNA序列分析和PCR鉴定表明成功构建了大鼠谷氨酸脱羧酶(GAD)毕赤酵母表达重组子.结论:为今后基因工程大量生产GAD抗原打下了基础.
目的:構建大鼠穀氨痠脫羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)巴斯德畢赤酵母(Pichia pastoris)錶達重組子,探索一條真覈細胞高效錶達rGAD的新途徑.方法:以pUC18-GAD質粒為模闆PCR擴增齣大鼠GAD65基因,將其剋隆入PGEM-Teasy載體,繼而將其剋隆到畢赤酵母分泌型質粒錶達載體pPIC9K中,重組質粒線性化後PEG法轉染入畢赤酵母菌株GS115,PCR篩選轉化子.結果:DNA序列分析和PCR鑒定錶明成功構建瞭大鼠穀氨痠脫羧酶(GAD)畢赤酵母錶達重組子.結論:為今後基因工程大量生產GAD抗原打下瞭基礎.
목적:구건대서곡안산탈최매(glutamic acid decarboxylase,GAD)파사덕필적효모(Pichia pastoris)표체중조자,탐색일조진핵세포고효표체rGAD적신도경.방법:이pUC18-GAD질립위모판PCR확증출대서GAD65기인,장기극륭입PGEM-Teasy재체,계이장기극륭도필적효모분비형질립표체재체pPIC9K중,중조질립선성화후PEG법전염입필적효모균주GS115,PCR사선전화자.결과:DNA서렬분석화PCR감정표명성공구건료대서곡안산탈최매(GAD)필적효모표체중조자.결론:위금후기인공정대량생산GAD항원타하료기출.
