中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2006年
4期
505-511
,共7页
间质干细胞%骨髓%QY1细胞系%SD大白鼠%生物学稳定性
間質榦細胞%骨髓%QY1細胞繫%SD大白鼠%生物學穩定性
간질간세포%골수%QY1세포계%SD대백서%생물학은정성
目的:探索建立Sprague-Dawley大白鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)系体外长期培养的适宜条件及其生物学特性,并分析其稳定性,为进一步研究MSCs的诱导分化和应用提供理想的细胞模型.方法:应用细胞生物学、干细胞组织工程学等方法培养并纯化骨髓MSCs,检测细胞生长的形态、换液时间、生长曲线、倍增时间、贴壁率、染色体、培养条件和反复冻存后复苏对其生物学特性的影响.结果:多次传代后的细胞呈均一的成纤维细胞样;骨髓MSCs原代培养10～12 d时融合至80%～90%,不同的首次换液时间之间差异没有统计学意义(P＞0.05);P1,P3,P10,P20代细胞生长曲线基本相同,细胞的倍增时间P1为34.2 h;P3为33.9 h;P10为31.8 h;P20为30.6 h.4代细胞任意两代之间的细胞数差异没有统计学意义(P＞0.05);传代后细胞迅速贴壁,约89%的细胞贴壁主要发生在接种后10 h内.4代细胞任意两代之间的贴壁率差异没有统计学意义(P＞0.05);在浓度为20%的标准胎牛血清中,骨髓MSCs的增殖活性最高;在种植细胞密度为8×104/mL时,骨髓MSCs的增殖活性最高;吉姆萨染色显示P8代骨髓MSCs胞浆为淡紫红色,胞核为深蓝色,细胞内可见1～2个核仁;P8和P20代细胞染色体形态及数目均正常,染色体核型组成均为42,XY,符合大鼠正常二倍体细胞系特征;反复冻存后复苏骨髓MSCs,其活细胞数＞85%.至今已体外培养10个多月.结论:QY1细胞系是纯的、可长期传代的细胞系,可扩增并保持未分化状态,且其生物学性能稳定.
目的:探索建立Sprague-Dawley大白鼠骨髓間質榦細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)繫體外長期培養的適宜條件及其生物學特性,併分析其穩定性,為進一步研究MSCs的誘導分化和應用提供理想的細胞模型.方法:應用細胞生物學、榦細胞組織工程學等方法培養併純化骨髓MSCs,檢測細胞生長的形態、換液時間、生長麯線、倍增時間、貼壁率、染色體、培養條件和反複凍存後複囌對其生物學特性的影響.結果:多次傳代後的細胞呈均一的成纖維細胞樣;骨髓MSCs原代培養10～12 d時融閤至80%～90%,不同的首次換液時間之間差異沒有統計學意義(P＞0.05);P1,P3,P10,P20代細胞生長麯線基本相同,細胞的倍增時間P1為34.2 h;P3為33.9 h;P10為31.8 h;P20為30.6 h.4代細胞任意兩代之間的細胞數差異沒有統計學意義(P＞0.05);傳代後細胞迅速貼壁,約89%的細胞貼壁主要髮生在接種後10 h內.4代細胞任意兩代之間的貼壁率差異沒有統計學意義(P＞0.05);在濃度為20%的標準胎牛血清中,骨髓MSCs的增殖活性最高;在種植細胞密度為8×104/mL時,骨髓MSCs的增殖活性最高;吉姆薩染色顯示P8代骨髓MSCs胞漿為淡紫紅色,胞覈為深藍色,細胞內可見1～2箇覈仁;P8和P20代細胞染色體形態及數目均正常,染色體覈型組成均為42,XY,符閤大鼠正常二倍體細胞繫特徵;反複凍存後複囌骨髓MSCs,其活細胞數＞85%.至今已體外培養10箇多月.結論:QY1細胞繫是純的、可長期傳代的細胞繫,可擴增併保持未分化狀態,且其生物學性能穩定.
목적:탐색건립Sprague-Dawley대백서골수간질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)계체외장기배양적괄의조건급기생물학특성,병분석기은정성,위진일보연구MSCs적유도분화화응용제공이상적세포모형.방법:응용세포생물학、간세포조직공정학등방법배양병순화골수MSCs,검측세포생장적형태、환액시간、생장곡선、배증시간、첩벽솔、염색체、배양조건화반복동존후복소대기생물학특성적영향.결과:다차전대후적세포정균일적성섬유세포양;골수MSCs원대배양10～12 d시융합지80%～90%,불동적수차환액시간지간차이몰유통계학의의(P＞0.05);P1,P3,P10,P20대세포생장곡선기본상동,세포적배증시간P1위34.2 h;P3위33.9 h;P10위31.8 h;P20위30.6 h.4대세포임의량대지간적세포수차이몰유통계학의의(P＞0.05);전대후세포신속첩벽,약89%적세포첩벽주요발생재접충후10 h내.4대세포임의량대지간적첩벽솔차이몰유통계학의의(P＞0.05);재농도위20%적표준태우혈청중,골수MSCs적증식활성최고;재충식세포밀도위8×104/mL시,골수MSCs적증식활성최고;길모살염색현시P8대골수MSCs포장위담자홍색,포핵위심람색,세포내가견1～2개핵인;P8화P20대세포염색체형태급수목균정상,염색체핵형조성균위42,XY,부합대서정상이배체세포계특정;반복동존후복소골수MSCs,기활세포수＞85%.지금이체외배양10개다월.결론:QY1세포계시순적、가장기전대적세포계,가확증병보지미분화상태,차기생물학성능은정.
