解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2006年
6期
640-645
,共6页
万榕%郑海音%宋军%翁绳美%林旭%林建银
萬榕%鄭海音%宋軍%翁繩美%林旭%林建銀
만용%정해음%송군%옹승미%림욱%림건은
蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂%肿瘤侵袭%肿瘤转移%Western blotting%黑色素瘤%小鼠
蛇毒半胱氨痠蛋白酶抑製劑%腫瘤侵襲%腫瘤轉移%Western blotting%黑色素瘤%小鼠
사독반광안산단백매억제제%종류침습%종류전이%Western blotting%흑색소류%소서
目的 探讨蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂cystatin(sv-cystatin)在黑色素瘤细胞侵袭与转移中的作用.方法 构建真核表达质粒pcDNA3.1/sv-cystatin,采用脂质体法将重组质粒导入小鼠黑色素瘤B16F1细胞,G418筛选抗性克隆,Western blotting法和RT-PCR鉴定sv-cystatin在黑色素瘤细胞中的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测肿瘤细胞体外生长和黏附能力的变化,体外侵袭、运动实验和小鼠实验性肺转移模型分析sv-cystatin表达对黑色素瘤细胞体内、外侵袭力的影响.结果 sv-cystatin基因稳定转染后B16F1细胞体外侵袭与运动能力明显降低,其穿膜的细胞数显著低于B16F1/pcDNA3.1空载体组和未转染细胞组(P＜0.01);sv-cystatin的表达可抑制C57BL/6小鼠肺转移瘤灶的形成;其体外增殖及黏附能力未见明显改变.结论 sv-cystatin基因转染可抑制黑色素瘤B16细胞的体内、外侵袭与转移能力.
目的 探討蛇毒半胱氨痠蛋白酶抑製劑cystatin(sv-cystatin)在黑色素瘤細胞侵襲與轉移中的作用.方法 構建真覈錶達質粒pcDNA3.1/sv-cystatin,採用脂質體法將重組質粒導入小鼠黑色素瘤B16F1細胞,G418篩選抗性剋隆,Western blotting法和RT-PCR鑒定sv-cystatin在黑色素瘤細胞中的錶達,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測腫瘤細胞體外生長和黏附能力的變化,體外侵襲、運動實驗和小鼠實驗性肺轉移模型分析sv-cystatin錶達對黑色素瘤細胞體內、外侵襲力的影響.結果 sv-cystatin基因穩定轉染後B16F1細胞體外侵襲與運動能力明顯降低,其穿膜的細胞數顯著低于B16F1/pcDNA3.1空載體組和未轉染細胞組(P＜0.01);sv-cystatin的錶達可抑製C57BL/6小鼠肺轉移瘤竈的形成;其體外增殖及黏附能力未見明顯改變.結論 sv-cystatin基因轉染可抑製黑色素瘤B16細胞的體內、外侵襲與轉移能力.
목적 탐토사독반광안산단백매억제제cystatin(sv-cystatin)재흑색소류세포침습여전이중적작용.방법 구건진핵표체질립pcDNA3.1/sv-cystatin,채용지질체법장중조질립도입소서흑색소류B16F1세포,G418사선항성극륭,Western blotting법화RT-PCR감정sv-cystatin재흑색소류세포중적표체,사갑기우담서염(MTT)법검측종류세포체외생장화점부능력적변화,체외침습、운동실험화소서실험성폐전이모형분석sv-cystatin표체대흑색소류세포체내、외침습력적영향.결과 sv-cystatin기인은정전염후B16F1세포체외침습여운동능력명현강저,기천막적세포수현저저우B16F1/pcDNA3.1공재체조화미전염세포조(P＜0.01);sv-cystatin적표체가억제C57BL/6소서폐전이류조적형성;기체외증식급점부능력미견명현개변.결론 sv-cystatin기인전염가억제흑색소류B16세포적체내、외침습여전이능력.
