CAJ | 학술논문

目的:构建人存活素(survivin)基因的siRNA真核表达载体,探讨其对骨肉瘤细胞SOSP-9607凋亡的影响.方法:利用pSilencer 3.0-H1 neo,构建人存活素特异性的RNA干涉载体,转染SOSP-9607细胞,G418筛选稳定转染的细胞系.westem blot检测survlvin蛋白水平变化.透射电镜等形态学观察、Annexin V法、Hoechst染色检测细胞凋亡.结果:成功构建了人存活素基因siRNA真核表达载体PS.获得了稳定转染的细胞系.与正常SOSP-9607细胞、阴性对照细胞相比,SOSP-9607/PS生长曲线十分平缓,存在显著差异(P＜0.01).western blot显示SOSP-9607/PS细胞中蛋白表达减少.SOSP-9607/PS凋亡率增加(P＜0.01).结论:特异性siRNA能够明显抑制survivin基因在SOSP-9607细胞中的表达并明显促进细胞凋亡,这为进一步研究survivin在SOSP-9607细胞中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础.
목적:구건인존활소(survivin)기인적siRNA진핵표체재체,탐토기대골육류세포SOSP-9607조망적영향.방법:이용pSilencer 3.0-H1 neo,구건인존활소특이성적RNA간섭재체,전염SOSP-9607세포,G418사선은정전염적세포계.westem blot검측survlvin단백수평변화.투사전경등형태학관찰、Annexin V법、Hoechst염색검측세포조망.결과:성공구건료인존활소기인siRNA진핵표체재체PS.획득료은정전염적세포계.여정상SOSP-9607세포、음성대조세포상비,SOSP-9607/PS생장곡선십분평완,존재현저차이(P＜0.01).western blot현시SOSP-9607/PS세포중단백표체감소.SOSP-9607/PS조망솔증가(P＜0.01).결론:특이성siRNA능구명현억제survivin기인재SOSP-9607세포중적표체병명현촉진세포조망,저위진일보연구survivin재SOSP-9607세포중적생물학공능화작용궤제전정료실험기출.