中华肿瘤防治杂志
中華腫瘤防治雜誌
중화종류방치잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER PREVENTION AND TREATMENT
2008年
21期
1647-1650,1673
,共5页
史泓浏%陈忠平%Petra Baumgaertner
史泓瀏%陳忠平%Petra Baumgaertner
사홍류%진충평%Petra Baumgaertner
抗原特异性T细胞%MAGE-A10(254-262)四聚体%功能试验
抗原特異性T細胞%MAGE-A10(254-262)四聚體%功能試驗
항원특이성T세포%MAGE-A10(254-262)사취체%공능시험
目的:探讨体外激发HLA-A2型人外周血单个核细胞(PBMC)中的MAGE-A10<,(254-262)>特异性T淋巴细胞及其功能检测方法.方法:分别采用肽段MAGE-A-10<,(254-262)>直接刺激PBMC的Bulk Culture法和自体DC负载肽段MAGE～A10<,(254-262)>刺激CD3<'+>CD8<'+>法,均经3次刺激进行体外扩增tetramer-MAGE-A10<,(254-262)>阳性T细胞.以人流感病毒肽段flu-matrix<,(58-66)>为阳性对照.Intracellular staining法检测其针对MAGE-A10<,(254-262)>的穿孔素、颗粒酶B的分泌能力.结果:HLA-A2型PBMC用BuckCulture或DC负载肽段刺激CD3<'+>CD8<'+>法培养,激发的tetramer-flu阳性T细胞率均>10%,DC法激发的tetramer-flu阳性T细胞率显著高于Buck Culture,t=9.79,P<0.01.Bulk Culture法得到的阳性T细胞率分别为0.01%和0.02%,DC法则分别是0.05%和0.12%.Sorting得到的tetram-er-MAGE-A10<,(254-262)>阳性T细胞,效靶比为10:1时其特异性杀伤为46%,细胞针对MAGE-A10<,(254-262)>分泌穿孔素、颗粒酶B的百分率分别为39%和87%.结论:从捐献的人血细胞中用自体DC负载肽段刺激CD3<'+>CD8<'+>法激发tetramer阳性T细胞的效率优于Bulk Culture法.
目的:探討體外激髮HLA-A2型人外週血單箇覈細胞(PBMC)中的MAGE-A10<,(254-262)>特異性T淋巴細胞及其功能檢測方法.方法:分彆採用肽段MAGE-A-10<,(254-262)>直接刺激PBMC的Bulk Culture法和自體DC負載肽段MAGE～A10<,(254-262)>刺激CD3<'+>CD8<'+>法,均經3次刺激進行體外擴增tetramer-MAGE-A10<,(254-262)>暘性T細胞.以人流感病毒肽段flu-matrix<,(58-66)>為暘性對照.Intracellular staining法檢測其針對MAGE-A10<,(254-262)>的穿孔素、顆粒酶B的分泌能力.結果:HLA-A2型PBMC用BuckCulture或DC負載肽段刺激CD3<'+>CD8<'+>法培養,激髮的tetramer-flu暘性T細胞率均>10%,DC法激髮的tetramer-flu暘性T細胞率顯著高于Buck Culture,t=9.79,P<0.01.Bulk Culture法得到的暘性T細胞率分彆為0.01%和0.02%,DC法則分彆是0.05%和0.12%.Sorting得到的tetram-er-MAGE-A10<,(254-262)>暘性T細胞,效靶比為10:1時其特異性殺傷為46%,細胞針對MAGE-A10<,(254-262)>分泌穿孔素、顆粒酶B的百分率分彆為39%和87%.結論:從捐獻的人血細胞中用自體DC負載肽段刺激CD3<'+>CD8<'+>法激髮tetramer暘性T細胞的效率優于Bulk Culture法.
목적:탐토체외격발HLA-A2형인외주혈단개핵세포(PBMC)중적MAGE-A10<,(254-262)>특이성T림파세포급기공능검측방법.방법:분별채용태단MAGE-A-10<,(254-262)>직접자격PBMC적Bulk Culture법화자체DC부재태단MAGE～A10<,(254-262)>자격CD3<'+>CD8<'+>법,균경3차자격진행체외확증tetramer-MAGE-A10<,(254-262)>양성T세포.이인류감병독태단flu-matrix<,(58-66)>위양성대조.Intracellular staining법검측기침대MAGE-A10<,(254-262)>적천공소、과립매B적분비능력.결과:HLA-A2형PBMC용BuckCulture혹DC부재태단자격CD3<'+>CD8<'+>법배양,격발적tetramer-flu양성T세포솔균>10%,DC법격발적tetramer-flu양성T세포솔현저고우Buck Culture,t=9.79,P<0.01.Bulk Culture법득도적양성T세포솔분별위0.01%화0.02%,DC법칙분별시0.05%화0.12%.Sorting득도적tetram-er-MAGE-A10<,(254-262)>양성T세포,효파비위10:1시기특이성살상위46%,세포침대MAGE-A10<,(254-262)>분비천공소、과립매B적백분솔분별위39%화87%.결론:종연헌적인혈세포중용자체DC부재태단자격CD3<'+>CD8<'+>법격발tetramer양성T세포적효솔우우Bulk Culture법.
