CAJ | 학술논문

目的应用基因芯片技术研究辛伐他汀对K562细胞基因表达的影响,初步探讨其作用机理.方法辛伐他汀作用K562细胞48h后,提取细胞总RNA.纯化mRNA后再逆转录为cDNA,将cDNA在体外转录合成cRNA,用随机引物反转录为cDNA,用Klenow酶标记Cy3、Cy5,与定制的包含人全基因组的基因芯片杂交,扫描芯片荧光信号,用GenePix Pro 4.0图像分析软件对芯片图像进行分析.定量RT-PCR验证芯片结果中两个差异表达基因.结果基因芯片检测发现共有176条基因表达发生明显改变,包括16条未知基因表达改变.其中151条基因表达上调, 25条基因表达下调.根据基因功能的不同,我们初步将其分为凋亡相关、信号转导相关、细胞周期相关等几大类.定量RT-PCR验证的基因表达变化趋势与表达谱芯片的结果相吻合.结论辛伐他汀作用K562细胞后能引起多种基因表达改变,这为探讨其作用机制提供了新的依据.
목적 응용기인심편기술연구신벌타정대K562세포기인표체적영향,초보탐토기작용궤리.방법 신벌타정작용K562세포48h후,제취세포총RNA.순화mRNA후재역전록위cDNA,장cDNA재체외전록합성cRNA,용수궤인물반전록위cDNA,용Klenow매표기Cy3、Cy5,여정제적포함인전기인조적기인심편잡교,소묘심편형광신호,용GenePix Pro 4.0도상분석연건대심편도상진행분석.정량RT-PCR험증심편결과중량개차이표체기인.결과 기인심편검측발현공유176조기인표체발생명현개변,포괄16조미지기인표체개변.기중151조기인표체상조, 25조기인표체하조.근거기인공능적불동,아문초보장기분위조망상관、신호전도상관、세포주기상관등궤대류.정량RT-PCR험증적기인표체변화추세여표체보심편적결과상문합.결론 신벌타정작용K562세포후능인기다충기인표체개변,저위탐토기작용궤제제공료신적의거.