CAJ | 학술논문

目的:研究肝癌细胞系SMMC7721肿瘤干细胞表面标志物,探讨细小病毒H-1非结构蛋白NS-1对肝癌细胞的生长抑制作用,以及其对肝癌细胞中具有干细胞特性群体的影响.方法:用流式细胞仪将肝癌细胞按细胞表面标志CD133、CD44进行分离,分为CD133+CD44+、CD133+CD44-、CD133-CD44+、CD133-CD44-4个群体,采用脂质体法将细小病毒H-1非结构蛋白NS-1质粒转染入人肝癌细胞SMMC7721,采用G418筛选稳定转染的细胞克隆,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞NS-1基因的表达.流式细胞仪分析SMMC7721转染前后肿瘤干细胞表面标志CD133、CD90、CD44的表达和细胞生长周期,检测细胞群体的变化.以裸鼠成瘤实验和软琼脂克隆形成实验评价具肿瘤干细胞性质的肝癌细胞表面标志物以及细小病毒H-1非结构蛋白NS-1转染对肝癌细胞生长的影响.结果:肝癌SMMC7721细胞分成CD133+CD44+、CD133+CD44-、CD133-CD44+、CD133-CD44-4组亚群的细胞存在着异质性,4组亚群细胞中均有少数肿瘤干细胞样细胞能在软琼脂上形成克隆,其中CD133+CD44+、CD133+CD44-亚群克隆形成率分别为3.5%和1.8%,CD133-CD44+、CD133-CD44-亚群克隆形成率为0.7%和0.5%.转染细小病毒H-1非结构蛋白NS-1后,4组亚群细胞克隆的形成率都显著下降.裸鼠成瘤实验提示,CD133+表型的细胞成瘤能力强于CD133-表型细胞,CD133-CD44+亚群细胞成瘤能力最弱.流式细胞仪分析显示转染NS-1后,CD133+群体细胞被明显抑制,由31.9%下降至6.3%,而CD90+和CD44+的表达未出现改变;转染NS-1后细胞S期百分率明显下降.结论:肝癌细胞表型为CD133+CD44+和CD133+CD44-亚群中富含肝癌干细胞,转染细小病毒H-1非结构蛋白基因NS-1的部分亚群SMMC7721细胞生长被抑制,提示其对肝癌细胞株中具有干细胞特性的CD133+群体有一定的抑制效应.
목적:연구간암세포계SMMC7721종류간세포표면표지물,탐토세소병독H-1비결구단백NS-1대간암세포적생장억제작용,이급기대간암세포중구유간세포특성군체적영향.방법:용류식세포의장간암세포안세포표면표지CD133、CD44진행분리,분위CD133+CD44+、CD133+CD44-、CD133-CD44+、CD133-CD44-4개군체,채용지질체법장세소병독H-1비결구단백NS-1질립전염입인간암세포SMMC7721,채용G418사선은정전염적세포극륭,반전록-취합매련반응(RT-PCR)검측전염세포NS-1기인적표체.류식세포의분석SMMC7721전염전후종류간세포표면표지CD133、CD90、CD44적표체화세포생장주기,검측세포군체적변화.이라서성류실험화연경지극륭형성실험평개구종류간세포성질적간암세포표면표지물이급세소병독H-1비결구단백NS-1전염대간암세포생장적영향.결과:간암SMMC7721세포분성CD133+CD44+、CD133+CD44-、CD133-CD44+、CD133-CD44-4조아군적세포존재착이질성,4조아군세포중균유소수종류간세포양세포능재연경지상형성극륭,기중CD133+CD44+、CD133+CD44-아군극륭형성솔분별위3.5%화1.8%,CD133-CD44+、CD133-CD44-아군극륭형성솔위0.7%화0.5%.전염세소병독H-1비결구단백NS-1후,4조아군세포극륭적형성솔도현저하강.라서성류실험제시,CD133+표형적세포성류능력강우CD133-표형세포,CD133-CD44+아군세포성류능력최약.류식세포의분석현시전염NS-1후,CD133+군체세포피명현억제,유31.9%하강지6.3%,이CD90+화CD44+적표체미출현개변;전염NS-1후세포S기백분솔명현하강.결론:간암세포표형위CD133+CD44+화CD133+CD44-아군중부함간암간세포,전염세소병독H-1비결구단백기인NS-1적부분아군SMMC7721세포생장피억제,제시기대간암세포주중구유간세포특성적CD133+군체유일정적억제효응.