畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
5期
80-82
,共3页
晏勇邦%陈芳艳%陈瑞爱%张秀%王林川
晏勇邦%陳芳豔%陳瑞愛%張秀%王林川
안용방%진방염%진서애%장수%왕림천
鸡痘病毒%PCR%检测%临床应用
鷄痘病毒%PCR%檢測%臨床應用
계두병독%PCR%검측%림상응용
根据已发表的鸡痘病毒(fowlpox virus,FPV)4 b核心蛋白基因的核苷酸序列设计合成了(P3,P5)1对引物,通过对影响PCR扩增条件的优化,在不同的退火温度下,直接以病毒液为模板扩增出预期的1 107bp的片段.特异性检测表明,两对引物对FPV102株、FPV282E4(北京)、大华农鸡痘疫苗毒株、重组鸡痘疫苗病毒及临床病料均能扩增出相应的特异性片段,而用鸡马立克氏病毒、传染性支气管炎病毒,鸽痘病毒及鸡胚成纤维细胞制备的模板进行PCR扩增均为阴性.敏感性检测表明,引物能检测0.195 ng/μL的模板量.用此方法检测50份临床样品.其中的阳性率为92%,用琼脂扩散试验方法检测的阳性率为70%.以上结果表明,该方法可以用于FPV临床样品的检测.
根據已髮錶的鷄痘病毒(fowlpox virus,FPV)4 b覈心蛋白基因的覈苷痠序列設計閤成瞭(P3,P5)1對引物,通過對影響PCR擴增條件的優化,在不同的退火溫度下,直接以病毒液為模闆擴增齣預期的1 107bp的片段.特異性檢測錶明,兩對引物對FPV102株、FPV282E4(北京)、大華農鷄痘疫苗毒株、重組鷄痘疫苗病毒及臨床病料均能擴增齣相應的特異性片段,而用鷄馬立剋氏病毒、傳染性支氣管炎病毒,鴿痘病毒及鷄胚成纖維細胞製備的模闆進行PCR擴增均為陰性.敏感性檢測錶明,引物能檢測0.195 ng/μL的模闆量.用此方法檢測50份臨床樣品.其中的暘性率為92%,用瓊脂擴散試驗方法檢測的暘性率為70%.以上結果錶明,該方法可以用于FPV臨床樣品的檢測.
근거이발표적계두병독(fowlpox virus,FPV)4 b핵심단백기인적핵감산서렬설계합성료(P3,P5)1대인물,통과대영향PCR확증조건적우화,재불동적퇴화온도하,직접이병독액위모판확증출예기적1 107bp적편단.특이성검측표명,량대인물대FPV102주、FPV282E4(북경)、대화농계두역묘독주、중조계두역묘병독급림상병료균능확증출상응적특이성편단,이용계마립극씨병독、전염성지기관염병독,합두병독급계배성섬유세포제비적모판진행PCR확증균위음성.민감성검측표명,인물능검측0.195 ng/μL적모판량.용차방법검측50빈림상양품.기중적양성솔위92%,용경지확산시험방법검측적양성솔위70%.이상결과표명,해방법가이용우FPV림상양품적검측.
