山东农业大学学报(自然科学版)
山東農業大學學報(自然科學版)
산동농업대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SHANDONG AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2011年
3期
428-432
,共5页
崔丽娜%牛钟相%姜文学%杨丽萍%高淑霞
崔麗娜%牛鐘相%薑文學%楊麗萍%高淑霞
최려나%우종상%강문학%양려평%고숙하
家兔%皮肤真菌%通用引物%快速检测
傢兔%皮膚真菌%通用引物%快速檢測
가토%피부진균%통용인물%쾌속검측
为了鉴定某规模化兔场发生皮肤真菌病的病原,并为家兔皮肤真菌病的快速检测提供一种分子生物学方法.根据皮肤真菌特异性rDNA序列设计通用引物(5’-CACCGCCCGTCGCTACTAC-3’和5’- TTTCG CTGCGT-TCTTCAT -3’),对已知分离株及其他微生物等进行特异性检测;应用该引物对所采取的种兔患部病料35份和临床健康种兔的样本5份,进行PCR检测并克隆测序.该引物对四种常见病原性皮肤真菌分离菌株扩增出一条在400bp -500bp之间的条带,其中红色毛癣菌和须癣毛癣菌为460bp,犬小孢子菌500bp,石膏样小孢子菌为400bp,但对其它微生物和兔体细胞均未扩增出类似片段,说明具有特异性;对临床35份病料中的33份均扩增出一条460bp条带,为毛癣菌属,与测序结果一致.健康种兔的样品未扩增出类似片段.本研究利用通用引物对家兔皮肤真菌病进行PCR检测并确定其主要病原,具有快速、简便和特异性强等特点,可用于大规模的家兔皮肤真菌病的诊断,并具有重要的公共卫生意义.
為瞭鑒定某規模化兔場髮生皮膚真菌病的病原,併為傢兔皮膚真菌病的快速檢測提供一種分子生物學方法.根據皮膚真菌特異性rDNA序列設計通用引物(5’-CACCGCCCGTCGCTACTAC-3’和5’- TTTCG CTGCGT-TCTTCAT -3’),對已知分離株及其他微生物等進行特異性檢測;應用該引物對所採取的種兔患部病料35份和臨床健康種兔的樣本5份,進行PCR檢測併剋隆測序.該引物對四種常見病原性皮膚真菌分離菌株擴增齣一條在400bp -500bp之間的條帶,其中紅色毛癬菌和鬚癬毛癬菌為460bp,犬小孢子菌500bp,石膏樣小孢子菌為400bp,但對其它微生物和兔體細胞均未擴增齣類似片段,說明具有特異性;對臨床35份病料中的33份均擴增齣一條460bp條帶,為毛癬菌屬,與測序結果一緻.健康種兔的樣品未擴增齣類似片段.本研究利用通用引物對傢兔皮膚真菌病進行PCR檢測併確定其主要病原,具有快速、簡便和特異性彊等特點,可用于大規模的傢兔皮膚真菌病的診斷,併具有重要的公共衛生意義.
위료감정모규모화토장발생피부진균병적병원,병위가토피부진균병적쾌속검측제공일충분자생물학방법.근거피부진균특이성rDNA서렬설계통용인물(5’-CACCGCCCGTCGCTACTAC-3’화5’- TTTCG CTGCGT-TCTTCAT -3’),대이지분리주급기타미생물등진행특이성검측;응용해인물대소채취적충토환부병료35빈화림상건강충토적양본5빈,진행PCR검측병극륭측서.해인물대사충상견병원성피부진균분리균주확증출일조재400bp -500bp지간적조대,기중홍색모선균화수선모선균위460bp,견소포자균500bp,석고양소포자균위400bp,단대기타미생물화토체세포균미확증출유사편단,설명구유특이성;대림상35빈병료중적33빈균확증출일조460bp조대,위모선균속,여측서결과일치.건강충토적양품미확증출유사편단.본연구이용통용인물대가토피부진균병진행PCR검측병학정기주요병원,구유쾌속、간편화특이성강등특점,가용우대규모적가토피부진균병적진단,병구유중요적공공위생의의.