实用肿瘤学杂志
實用腫瘤學雜誌
실용종류학잡지
JOURNAL OF PRACTICAL ONCOLOGY
2012年
1期
37-41
,共5页
徐向英%许德权%陈蜜%赵芳宗%胡松柳%徐建宇
徐嚮英%許德權%陳蜜%趙芳宗%鬍鬆柳%徐建宇
서향영%허덕권%진밀%조방종%호송류%서건우
肺癌%Bcl-2基因%RNA干扰%放射敏感性%细胞周期
肺癌%Bcl-2基因%RNA榦擾%放射敏感性%細胞週期
폐암%Bcl-2기인%RNA간우%방사민감성%세포주기
目的 利用RNAi技术抑制Bcl-2基因的表达,联合放疗后观察其对非小细胞肺癌NCI-H460株细胞周期及细胞增殖状态的影响.方法 利用以pCYU6/GFP/Neo为载体的Bcl-2/shRNA重组质粒转染非小细胞肺癌NCI-H460细胞株,采用Western blot方法检测Bcl-2基因蛋白表达水平的变化,继而给予直线加速器6Gy X线照射,采用MTT法和流式细胞术检测RNA干扰及照射后对NCI-H460细胞增殖和细胞周期的影响.结果 成功转染并经筛选获得阳性转染成功的细胞(HT),荧光显微镜下可见发绿色荧光的NCI-H460细胞,证明转染成功;Western blot检测显示Bcl-2蛋白表达水平显著降低;X线照射6Gy,24h及48h后转染有义序列组细胞增殖情况较无义序列组及未转染组明显降低;流式细胞术显示转染有义序列细胞组经照射后24小时G2/M期分布比例增高,48小时后G2/M期分布比例显著减低.结论 RNAi技术可以有效的抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞Bcl-2基因表达,联合放疗后NCI-H460细胞的增殖率及细胞周期发生改变,起到一定的放射增敏作用.
目的 利用RNAi技術抑製Bcl-2基因的錶達,聯閤放療後觀察其對非小細胞肺癌NCI-H460株細胞週期及細胞增殖狀態的影響.方法 利用以pCYU6/GFP/Neo為載體的Bcl-2/shRNA重組質粒轉染非小細胞肺癌NCI-H460細胞株,採用Western blot方法檢測Bcl-2基因蛋白錶達水平的變化,繼而給予直線加速器6Gy X線照射,採用MTT法和流式細胞術檢測RNA榦擾及照射後對NCI-H460細胞增殖和細胞週期的影響.結果 成功轉染併經篩選穫得暘性轉染成功的細胞(HT),熒光顯微鏡下可見髮綠色熒光的NCI-H460細胞,證明轉染成功;Western blot檢測顯示Bcl-2蛋白錶達水平顯著降低;X線照射6Gy,24h及48h後轉染有義序列組細胞增殖情況較無義序列組及未轉染組明顯降低;流式細胞術顯示轉染有義序列細胞組經照射後24小時G2/M期分佈比例增高,48小時後G2/M期分佈比例顯著減低.結論 RNAi技術可以有效的抑製非小細胞肺癌NCI-H460細胞Bcl-2基因錶達,聯閤放療後NCI-H460細胞的增殖率及細胞週期髮生改變,起到一定的放射增敏作用.
목적 이용RNAi기술억제Bcl-2기인적표체,연합방료후관찰기대비소세포폐암NCI-H460주세포주기급세포증식상태적영향.방법 이용이pCYU6/GFP/Neo위재체적Bcl-2/shRNA중조질립전염비소세포폐암NCI-H460세포주,채용Western blot방법검측Bcl-2기인단백표체수평적변화,계이급여직선가속기6Gy X선조사,채용MTT법화류식세포술검측RNA간우급조사후대NCI-H460세포증식화세포주기적영향.결과 성공전염병경사선획득양성전염성공적세포(HT),형광현미경하가견발록색형광적NCI-H460세포,증명전염성공;Western blot검측현시Bcl-2단백표체수평현저강저;X선조사6Gy,24h급48h후전염유의서렬조세포증식정황교무의서렬조급미전염조명현강저;류식세포술현시전염유의서렬세포조경조사후24소시G2/M기분포비례증고,48소시후G2/M기분포비례현저감저.결론 RNAi기술가이유효적억제비소세포폐암NCI-H460세포Bcl-2기인표체,연합방료후NCI-H460세포적증식솔급세포주기발생개변,기도일정적방사증민작용.
