中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
7期
1166-1171
,共6页
范俊%杨成明%连继勤%曾春雨%倪振洪%林德胜%冉希
範俊%楊成明%連繼勤%曾春雨%倪振洪%林德勝%冉希
범준%양성명%련계근%증춘우%예진홍%림덕성%염희
自噬%血管紧张素Ⅱ%血管内皮细胞%活性氧簇%氧化性应激
自噬%血管緊張素Ⅱ%血管內皮細胞%活性氧簇%氧化性應激
자서%혈관긴장소Ⅱ%혈관내피세포%활성양족%양화성응격
目的:研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对血管内皮细胞自噬的影响及其可能机制.方法:以EA.hy926血管内皮细胞为研究对象,荧光酶标仪检测AngⅡ(10-7mol/L)、AngⅡ联合N-乙酰半胱氨酸(NAC,50 μmol/L)作用24 h后细胞中活性氧簇(ROS)水平;用不同浓度(10-8、10-7、10-6mol/L)AngⅡ作用24 h或10-7mol/L AngⅡ作用不同时间(0 h、6 h、12 h、24 h、36 h)后,通过Western blotting分析微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白变化、吖啶橙染色结合荧光显微镜观察自噬体形成情况来判断细胞中自噬发生情况;AngⅡ(10-7mol/L)联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA,2 mmol/L)或NAC(50 μmol/L)处理24 h后用同样方法检测细胞中自噬的发生情况.结果:细胞经AngⅡ刺激后细胞内ROS的水平显著升高(P<0.05),LC3-Ⅱ蛋白表达明显增强(P<0.05),自噬体形成明显增加;3-MA或NAC可显著抑制内皮细胞中AngⅡ诱导的LC3-Ⅱ蛋白表达(P<0.05)与自噬体形成.结论:AngⅡ可以通过升高血管内皮细胞内ROS的水平从而诱导自噬的发生.
目的:研究血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)對血管內皮細胞自噬的影響及其可能機製.方法:以EA.hy926血管內皮細胞為研究對象,熒光酶標儀檢測AngⅡ(10-7mol/L)、AngⅡ聯閤N-乙酰半胱氨痠(NAC,50 μmol/L)作用24 h後細胞中活性氧簇(ROS)水平;用不同濃度(10-8、10-7、10-6mol/L)AngⅡ作用24 h或10-7mol/L AngⅡ作用不同時間(0 h、6 h、12 h、24 h、36 h)後,通過Western blotting分析微管相關蛋白輕鏈3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白變化、吖啶橙染色結閤熒光顯微鏡觀察自噬體形成情況來判斷細胞中自噬髮生情況;AngⅡ(10-7mol/L)聯閤自噬抑製劑3-甲基腺嘌呤(3-MA,2 mmol/L)或NAC(50 μmol/L)處理24 h後用同樣方法檢測細胞中自噬的髮生情況.結果:細胞經AngⅡ刺激後細胞內ROS的水平顯著升高(P<0.05),LC3-Ⅱ蛋白錶達明顯增彊(P<0.05),自噬體形成明顯增加;3-MA或NAC可顯著抑製內皮細胞中AngⅡ誘導的LC3-Ⅱ蛋白錶達(P<0.05)與自噬體形成.結論:AngⅡ可以通過升高血管內皮細胞內ROS的水平從而誘導自噬的髮生.
목적:연구혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)대혈관내피세포자서적영향급기가능궤제.방법:이EA.hy926혈관내피세포위연구대상,형광매표의검측AngⅡ(10-7mol/L)、AngⅡ연합N-을선반광안산(NAC,50 μmol/L)작용24 h후세포중활성양족(ROS)수평;용불동농도(10-8、10-7、10-6mol/L)AngⅡ작용24 h혹10-7mol/L AngⅡ작용불동시간(0 h、6 h、12 h、24 h、36 h)후,통과Western blotting분석미관상관단백경련3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)단백변화、아정등염색결합형광현미경관찰자서체형성정황래판단세포중자서발생정황;AngⅡ(10-7mol/L)연합자서억제제3-갑기선표령(3-MA,2 mmol/L)혹NAC(50 μmol/L)처리24 h후용동양방법검측세포중자서적발생정황.결과:세포경AngⅡ자격후세포내ROS적수평현저승고(P<0.05),LC3-Ⅱ단백표체명현증강(P<0.05),자서체형성명현증가;3-MA혹NAC가현저억제내피세포중AngⅡ유도적LC3-Ⅱ단백표체(P<0.05)여자서체형성.결론:AngⅡ가이통과승고혈관내피세포내ROS적수평종이유도자서적발생.
