上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2012年
6期
699-705
,共7页
梁永俊%周饮想%宇小婷%赵倩
樑永俊%週飲想%宇小婷%趙倩
량영준%주음상%우소정%조천
miR-506%乳腺癌%上皮间充质转化%Slug
miR-506%乳腺癌%上皮間充質轉化%Slug
miR-506%유선암%상피간충질전화%Slug
目的 探讨miR-506通过靶向Slug调节上皮间充质转化对乳腺癌细胞侵袭和转移的抑制作用.方法 采用实时荧光定量PCR检测8株乳腺癌细胞系(MCF7、BT474、SK-BR-3、MDA-MB-453、MDA-MB-468、HCC1937、BT549和MDA -MB -231)中miR-506的表达量,以正常乳腺上皮细胞MCF10A为对照.通过脂质体转染的方法在MDA-MB-231和BT549细胞系中瞬时过表达miR-606模拟物(设阴性对照),通过划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验观察细胞运动能力的变化；观察MDA-MB-231和BT549细胞系转染miR-506前后细胞形态学变化；Western blotting法检测E-cadherin、Vimemin和Slug蛋白表达的变化.荧光素酶报告基因分析实验检测M DA-MB-231细胞中miR-506过表达对野生型荧光素酶活性的影响.结果 miR-506在各乳腺癌细胞中的表达量相对于正常乳腺上皮细胞MCF10A显著降低(P＜0.01).miR-506过表达显著抑制MDA-MB-231和BT549细胞的迁移和侵袭能力,与阴性对照的差异有统计学意义(P＜0.01).MDA-MB-231和BT549细胞瞬时转染miR-506 48 h后发生明显的形态学改变；Western blotting结果显示miR-506过表达在MDA-MB-231和BT549细胞中均上调E-cadherin的表达,下调Vimentin的表达.Western blotting检测结果显示MDA-MB-231细胞转染miR-506后Slug蛋白水平明显低于阴性对照；荧光素酶报告基因分析结果显示miR-506过表达显著抑制野生型荧光素酶的活性.结论 在乳腺癌中,miR-506可以通过靶向转录因子Slug诱导细胞发生上皮间充质转化,进而抑制细胞的侵袭和转移能力,这是miR-506参与乳腺癌发生和发展的可能途径之一.
目的 探討miR-506通過靶嚮Slug調節上皮間充質轉化對乳腺癌細胞侵襲和轉移的抑製作用.方法 採用實時熒光定量PCR檢測8株乳腺癌細胞繫(MCF7、BT474、SK-BR-3、MDA-MB-453、MDA-MB-468、HCC1937、BT549和MDA -MB -231)中miR-506的錶達量,以正常乳腺上皮細胞MCF10A為對照.通過脂質體轉染的方法在MDA-MB-231和BT549細胞繫中瞬時過錶達miR-606模擬物(設陰性對照),通過劃痕實驗、Transwell遷移和侵襲實驗觀察細胞運動能力的變化；觀察MDA-MB-231和BT549細胞繫轉染miR-506前後細胞形態學變化；Western blotting法檢測E-cadherin、Vimemin和Slug蛋白錶達的變化.熒光素酶報告基因分析實驗檢測M DA-MB-231細胞中miR-506過錶達對野生型熒光素酶活性的影響.結果 miR-506在各乳腺癌細胞中的錶達量相對于正常乳腺上皮細胞MCF10A顯著降低(P＜0.01).miR-506過錶達顯著抑製MDA-MB-231和BT549細胞的遷移和侵襲能力,與陰性對照的差異有統計學意義(P＜0.01).MDA-MB-231和BT549細胞瞬時轉染miR-506 48 h後髮生明顯的形態學改變；Western blotting結果顯示miR-506過錶達在MDA-MB-231和BT549細胞中均上調E-cadherin的錶達,下調Vimentin的錶達.Western blotting檢測結果顯示MDA-MB-231細胞轉染miR-506後Slug蛋白水平明顯低于陰性對照；熒光素酶報告基因分析結果顯示miR-506過錶達顯著抑製野生型熒光素酶的活性.結論 在乳腺癌中,miR-506可以通過靶嚮轉錄因子Slug誘導細胞髮生上皮間充質轉化,進而抑製細胞的侵襲和轉移能力,這是miR-506參與乳腺癌髮生和髮展的可能途徑之一.
목적 탐토miR-506통과파향Slug조절상피간충질전화대유선암세포침습화전이적억제작용.방법 채용실시형광정량PCR검측8주유선암세포계(MCF7、BT474、SK-BR-3、MDA-MB-453、MDA-MB-468、HCC1937、BT549화MDA -MB -231)중miR-506적표체량,이정상유선상피세포MCF10A위대조.통과지질체전염적방법재MDA-MB-231화BT549세포계중순시과표체miR-606모의물(설음성대조),통과화흔실험、Transwell천이화침습실험관찰세포운동능력적변화；관찰MDA-MB-231화BT549세포계전염miR-506전후세포형태학변화；Western blotting법검측E-cadherin、Vimemin화Slug단백표체적변화.형광소매보고기인분석실험검측M DA-MB-231세포중miR-506과표체대야생형형광소매활성적영향.결과 miR-506재각유선암세포중적표체량상대우정상유선상피세포MCF10A현저강저(P＜0.01).miR-506과표체현저억제MDA-MB-231화BT549세포적천이화침습능력,여음성대조적차이유통계학의의(P＜0.01).MDA-MB-231화BT549세포순시전염miR-506 48 h후발생명현적형태학개변；Western blotting결과현시miR-506과표체재MDA-MB-231화BT549세포중균상조E-cadherin적표체,하조Vimentin적표체.Western blotting검측결과현시MDA-MB-231세포전염miR-506후Slug단백수평명현저우음성대조；형광소매보고기인분석결과현시miR-506과표체현저억제야생형형광소매적활성.결론 재유선암중,miR-506가이통과파향전록인자Slug유도세포발생상피간충질전화,진이억제세포적침습화전이능력,저시miR-506삼여유선암발생화발전적가능도경지일.
