中华检验医学杂志
中華檢驗醫學雜誌
중화검험의학잡지
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2006年
11期
991-995
,共5页
秦效英%秦亚溱%刘艳荣%李金兰%李国选%江滨%陈珊珊%陆道培
秦效英%秦亞溱%劉豔榮%李金蘭%李國選%江濱%陳珊珊%陸道培
진효영%진아진%류염영%리금란%리국선%강빈%진산산%륙도배
色谱法,高压液相%ABL激酶区%点突变%白血病,髓样,慢性
色譜法,高壓液相%ABL激酶區%點突變%白血病,髓樣,慢性
색보법,고압액상%ABL격매구%점돌변%백혈병,수양,만성
目的 应用变性高效液相色谱(DHPLC)检测伊马替尼治疗后慢性髓性白血病(CML)患者ABL激酶区点突变.方法 采用巢式PCR扩增27例伊马替尼治疗的加速/急变期或慢性期后期的CML患者的31份骨髓标本,扩增得到BCR/ABL融合mRNA的 ABL激酶区的相互重叠的两段扩增片段:ABL-B(393 bp,相应于206～335氨基酸)和ABL-C(482 bp,相应于262～421氨基酸).应用DHPLC在不同温度及洗脱条件下对此两扩增片段进行突变分析,并与测序结果进行比较. 结果 27例伊马替尼疗效不佳的加速/急变期或慢性期后期的CML患者中,13例(48%)患者的DHPLC检测显示异常峰型,提示存在点突变,与直接测序的结果完全一致.本研究中DHPLC检测ABL激酶区点突变的检出限可达5%～10%.结论 DHPLC可以高效、经济、准确地检测ABL激酶区点突变,适合于伊马替尼治疗后慢性髓性白血病患者ABL激酶区点突变的常规、临床大规模检测.
目的 應用變性高效液相色譜(DHPLC)檢測伊馬替尼治療後慢性髓性白血病(CML)患者ABL激酶區點突變.方法 採用巢式PCR擴增27例伊馬替尼治療的加速/急變期或慢性期後期的CML患者的31份骨髓標本,擴增得到BCR/ABL融閤mRNA的 ABL激酶區的相互重疊的兩段擴增片段:ABL-B(393 bp,相應于206～335氨基痠)和ABL-C(482 bp,相應于262～421氨基痠).應用DHPLC在不同溫度及洗脫條件下對此兩擴增片段進行突變分析,併與測序結果進行比較. 結果 27例伊馬替尼療效不佳的加速/急變期或慢性期後期的CML患者中,13例(48%)患者的DHPLC檢測顯示異常峰型,提示存在點突變,與直接測序的結果完全一緻.本研究中DHPLC檢測ABL激酶區點突變的檢齣限可達5%～10%.結論 DHPLC可以高效、經濟、準確地檢測ABL激酶區點突變,適閤于伊馬替尼治療後慢性髓性白血病患者ABL激酶區點突變的常規、臨床大規模檢測.
목적 응용변성고효액상색보(DHPLC)검측이마체니치료후만성수성백혈병(CML)환자ABL격매구점돌변.방법 채용소식PCR확증27례이마체니치료적가속/급변기혹만성기후기적CML환자적31빈골수표본,확증득도BCR/ABL융합mRNA적 ABL격매구적상호중첩적량단확증편단:ABL-B(393 bp,상응우206～335안기산)화ABL-C(482 bp,상응우262～421안기산).응용DHPLC재불동온도급세탈조건하대차량확증편단진행돌변분석,병여측서결과진행비교. 결과 27례이마체니료효불가적가속/급변기혹만성기후기적CML환자중,13례(48%)환자적DHPLC검측현시이상봉형,제시존재점돌변,여직접측서적결과완전일치.본연구중DHPLC검측ABL격매구점돌변적검출한가체5%～10%.결론 DHPLC가이고효、경제、준학지검측ABL격매구점돌변,괄합우이마체니치료후만성수성백혈병환자ABL격매구점돌변적상규、림상대규모검측.
