CAJ | 학술논문

背景与目的INK4a/ARF基因是重要的细胞周期调控基因,其表达产物p16INK4a和p14ARF蛋白分别在Rb和p53通路中发挥重要调节作用.本研究将野生型INK4a/ARF基因同时转染到该基因位点缺失的人肺腺癌A549细胞中,研究其对该细胞生物学行为的影响.方法利用阳离子脂质体介导的基因转染技术,将含有人全长野生型INK4a/ARF基因的真核表达重组质粒pcDNA3-p16INK4a和pcDNA3-p14ARF同时导入A549细胞系中,确定所编码蛋白p16INK4a和p14ARF稳定表达;在设立空白组和空质粒转染组的情况下,进行了转染前后细胞生长曲线、克隆形成率、周期分布、凋亡指数等指标的检测和分析.结果转染INK4a/ARF基因后的细胞G2/G1期比例为59.9%,与未转染(51.2%)及空质粒转染(50.3%)细胞相比差异显著(P值分别为0.043和0.025),同时S期和G2/M期的比例下降;转染后细胞克隆形成率为63%,未转染细胞和空质粒转染细胞分别为85%和87%(P值均＜0.01),凋亡指数明显增加,转染INK4a/ARF基因后的细胞凋亡率为8.0%,另两种细胞均为2.7%,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论阳离子脂质体可以有效地将INK4a/ARF基因导入A549细胞,并可以抑制A549细胞的生长,促进凋亡作用的增强,为将来肺癌的基因治疗提供了实验依据.
배경여목적INK4a/ARF기인시중요적세포주기조공기인,기표체산물p16INK4a화p14ARF단백분별재Rb화p53통로중발휘중요조절작용.본연구장야생형INK4a/ARF기인동시전염도해기인위점결실적인폐선암A549세포중,연구기대해세포생물학행위적영향.방법이용양리자지질체개도적기인전염기술,장함유인전장야생형INK4a/ARF기인적진핵표체중조질립pcDNA3-p16INK4a화pcDNA3-p14ARF동시도입A549세포계중,학정소편마단백p16INK4a화p14ARF은정표체;재설립공백조화공질립전염조적정황하,진행료전염전후세포생장곡선、극륭형성솔、주기분포、조망지수등지표적검측화분석.결과전염INK4a/ARF기인후적세포G2/G1기비례위59.9%,여미전염(51.2%)급공질립전염(50.3%)세포상비차이현저(P치분별위0.043화0.025),동시S기화G2/M기적비례하강;전염후세포극륭형성솔위63%,미전염세포화공질립전염세포분별위85%화87%(P치균＜0.01),조망지수명현증가,전염INK4a/ARF기인후적세포조망솔위8.0%,령량충세포균위2.7%,차이구유통계학의의(P＜0.01).결론양리자지질체가이유효지장INK4a/ARF기인도입A549세포,병가이억제A549세포적생장,촉진조망작용적증강,위장래폐암적기인치료제공료실험의거.