CAJ | 학술논문

以干旱胁迫下斑茅(Saccharum arundinaceum Retz.)叶片组织的cDNA为Tester,正常生长条件下斑茅叶片组织cDNA为Driver,利用抑制性消减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridization, SSH)构建斑茅干旱胁迫消减文库.文库克隆总量约为30000个,克隆重组率为99.2%;随机从文库中挑取3500个克隆分析表明,插入片段长度主要集中在200～1000 bp之间,500 bp以上的有463个克隆,500 bp以下的有3037个克隆,平均长度约450 bp; 通过随机对16个文库阳性克隆的测序及分析,3个克隆与ATP-NAD kinase、Aldo/keto reductase和锌指蛋白高度同源,3个克隆没有同源性,10个与逆境相关,是功能未知的EST.选择编号为EL0149和EL0145两个克隆进行Northern杂交验证,结果表明EL0149克隆为干旱胁迫上调表达的EST序列,而EL0145在正常供水和干旱条件下均无明显的的杂交信号.说明本研究克隆的SSH文库质量较高,可以进一步利用SSH文库结合芯片表达谱分析作物水分胁迫下的相关抗旱基因网络.
이간한협박하반모(Saccharum arundinaceum Retz.)협편조직적cDNA위Tester,정상생장조건하반모협편조직cDNA위Driver,이용억제성소감잡교기술(Suppression Subtractive Hybridization, SSH)구건반모간한협박소감문고.문고극륭총량약위30000개,극륭중조솔위99.2%;수궤종문고중도취3500개극륭분석표명,삽입편단장도주요집중재200～1000 bp지간,500 bp이상적유463개극륭,500 bp이하적유3037개극륭,평균장도약450 bp; 통과수궤대16개문고양성극륭적측서급분석,3개극륭여ATP-NAD kinase、Aldo/keto reductase화자지단백고도동원,3개극륭몰유동원성,10개여역경상관,시공능미지적EST.선택편호위EL0149화EL0145량개극륭진행Northern잡교험증,결과표명EL0149극륭위간한협박상조표체적EST서렬,이EL0145재정상공수화간한조건하균무명현적적잡교신호.설명본연구극륭적SSH문고질량교고,가이진일보이용SSH문고결합심편표체보분석작물수분협박하적상관항한기인망락.